METHOD OF PRODUCING RECOMBINANT SUCROSE SYNTHASE, USE THEREOF IN THE PRODUCTION OF SUCROSE-DETERMINATION KITS, METHOD OF PRODUCING ADPGLUCOSE AND METHOD OF OBTAINING TRANSGENIC PLANTS HAVING LEAVES AND RESERVE ORGANS WHICH ACCUMULATE A HIGH CONCENTRATION OF ADPGLUCOSE AND STARCH

• Main Authors: MORAN ZORZANO, MARIA TERESA, ALONSO CASAJUS, NORA, MUNOZ PEREZ, FRANCISCO JOSE, BAROJA FERNANDEZ, MIREN EDURNE, POZUETA ROMERO, FRANCISCO JAVIER
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 25.02.2020
• Subjects: AGRICULTURE; ANIMAL HUSBANDRY; BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; FISHING; FORESTRY; HUMAN NECESSITIES; HUNTING; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; NEW PLANTS OR PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; TRAPPING; VINEGAR; WINE

It is provided a method for the efficient production of large quantities of soluble recombinant sucrose synthase (SS) in the active form thereof, with the expression of the gene that codes for SS in a strain of Escherichia coli. The expression vector used enables the recombinant SS thus produced to have a histidine tail which facilitates the rapid purification thereof. In addition, it is provided sequences of mutated versions of the SS gene, which code for SS isoforms that are suitable for the production of ADPG. It is also provided a method of obtaining transgenic plants which overexpress the SS gene, either constituently or in the reserve organs or leaves thereof, and which have a high concentration (both in the leaves and in the reserve tissues) of sucrose, ADPG, G6P and starch owing to the high ADPG-synthesising activity of SS. Un procédé de production efficace de grandes quantités de SS recombinante soluble sous sa forme active au moyen de l'expression du gène codant pour la SS dans une souche de Escherichia coli. Le vecteur d'expression utilisé permet que la SS recombinante obtenue possède une queue d'histidines facilitant sa purification de manière rapide. Sont également décrites les séquences de version mutées du gène de la SS codant pour des isoformes de la SS adéquates pour la production de ADPG. Grâce à l'utilisation des versions "sylvestre" et "mutée" de SS recombinante, on décrit un procédé efficace de production d'ADPG et UDPG. On décrit également l'utilisation de la SS pour la production de dispositifs d'essai de détermination de saccharose. Finalement, on décrit la description de plantes transgéniques qui surexpriment le gène de la SS, soit par constitution, soit sous forme de feuilles ou organes de réserve, et qui possèdent une forte teneur (en feuilles et en tissus de réserve) en saccharose, ADPG, G6P et amidon comme résultat de la forte activité de synthèse d'ADPG de la SS.