MOLECULAR DETECTION SYSTEMS UTILIZING REITERATIVE OLIGONUCLEOTIDE SYNTHESIS

• Main Author: HANNA, MICHELLE M
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 22.01.2013
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; DERIVATIVES THEREOF; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; NUCLEIC ACIDS; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; ORGANIC CHEMISTRY; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; SUGARS; VINEGAR; WINE

The present invention provides methods for detecting the presence of a target molecule by generating multiple detectable oligonucleotides through reiterative enzymatic oligonucleotide synthesis events on a defined polynucleotide sequence. The methods generally comprise using a nucleoside, a mononucleotide, and oligonucleotide, or a polynucleotide, or analog thereof, to initiate synthesis of an oligonucleotide product that is substantially complementary to a target site on the defined polynucleotide sequence; optionally using nucleotides or nucleotide anologs as oligonucleotide chain elongators; using a chain terminator to terminate the polymerization reaction; and detecting multiple oligonucleotide products that have been synthesized by the polymerase. In one aspect, the invention provides a method for detecting a target protein, DNA or RNA by generating multiple detectable RNA oligoribonucleotides by abortive transcription. La présente invention concerne des procédés qui permettent de détecter la présence d'une molécule cible et qui consistent à générer une pluralité d'oligonucléotides détectables au moyen d'événements répétés de synthèse d'oligonucléotides enzymatiques survenant sur une séquence polynucléotidique définie. Les procédés consistent généralement à utiliser un nucléoside, un mononucléotide, un oligonucléotide ou un polynucléotide ou bien encore un analogue de ce dernier, pour démarrer la synthèse d'un produit oligonucléotidique qui est sensiblement complémentaire à un site cible sur la séquence polynucléotidique définie; à utiliser éventuellement des nucléotides ou des analogues de nucléotides en tant qu'allongeurs de chaînes oligonucléotidiques; à utiliser un terminateur de chaîne pour mettre un terme à la réaction de polymérisation; et à détecter plusieurs produits oligonucléotidiques qui ont été synthétisés par la polymérase. Selon un aspect, cette invention concerne un procédé de détection d'une protéine cible, d'un ADN ou d'un ARN cible, qui consiste à générer, par transcription abortive, plusieurs oligoribonucléotides d'ARN détectables.