processo de produção em grande escala para cisteínas de anticorpo capeadas e não capeadas e seu uso na conjugação de proteínas terapêuticas

• Main Authors: AMARNAUTH SHASTRIE PRASHAD, JOSE MANUEL GOMES, KAUSHIK DUTTA, VIMALKUMAR B. PATEL, FRANK W. KOTCH, XIAOTIAN ZHONG, RENEE L. PROCOPIO-MELINO
• Format: Patent
• Language: Portuguese
• Published: 10.03.2020
• Subjects: CHEMISTRY; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES

a presente invenção refere-se a otimização da produção de cisteínas seletivamente capeadas e não capeadas em anticorpos através da manipulação das condições de crescimento celular incluindo a depleção deliberada da cisteína e/ou cistina no processo de cultura celular por meio de componentes do meio, duração de batelada, ou densidade celular para alcançar uma produção eficiente de proteínas incluindo conjugados de anticorpos-fármaco (adcs); conjugação de uma proteína contendo cisteína capeada com tnb através da sua reação com um agente redutor capaz de separar os componentes de capeamento com tnb da proteína sem reduzir significativamente as ligações de enxofre intercadeias de anticorpos, e conjugação das ligações de enxofre reduzidas na proteína com uma carga útil através de um componente de ligação reativa. Optimizing production of selectively capped, and uncapped, cysteines on antibodies by manipulation of cell growth conditions including the deliberate depletion of cysteine and/or cystine in the cell culture process by way of media components, batch duration, or cell density to achieve efficient production of proteins including antibody-drug-conjugates (ADCs).; conjugating a TNB-capped cysteine-containing protein by reacting it with a reducing agent capable of detaching the TNB-capping moieties from the protein without significantly reducing antibody inter-chain sulfur bonds, and conjugating reduced sulfur bonds on the protein to a payload through a reactive linking moiety.