MÉTODO IN VITRO, KIT E USO DE UMA COMBINAÇÃO DE INICIADORES PARA O DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DE INFECÇÕES DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL POR HERPESVÍRUS

• Main Authors: MARCO ANTONIO SALES DANTAS DE LIMA, BRUNA DE MORAIS GUEDES DOS SANTOS, OTÁVIO DE MELO ESPÍNDOLA
• Format: Patent
• Language: Portuguese
• Published: 27.12.2022
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; ENZYMOLOGY; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROCESSES USING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

MÉTODO IN VITRO, KIT E USO DE UMA COMBINAÇÃO DE INICIADORES PARA O DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DE INFECÇÕES DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL POR HERPESVÍRUS. A presente invenção se refere a um método in vitro para o diagnóstico diferencial de infecções do sistema nervoso central por herpesvírus, compreendendo as etapas de extração de DNA de amostra de líquido cefalorraquidiano humano; amplificação por PCR em tempo real multiplex usando os iniciadores como definidos em qualquer uma das sequências SEQ ID NO: 1 to 12; e identificação do(s) amplicon(s) produzido(s) de acordo com a temperatura de dissociação (Tm) a partir de curvas de dissociação com alta resolução (HRM). A presente invenção se refere ainda a um kit para diagnóstico diferencial de infecções do sistema nervoso central por herpesvírus compreendendo uma combinação de iniciadores selecionados dentre o grupo SEQ ID NO: 1 a 12; DNA humano comercial e água, como controles negativos; e DNAs plasmidiais contendo as sequências virais como controles positivos; e reagentes para a reação de PCR em tempo real multiplex. A presente invenção se refere ainda ao uso de uma combinação de iniciadores selecionados dentre o grupo SEQ ID NO: 1 a 12, para diagnóstico diferencial de infecções do sistema nervoso central por herpesvírus. The present invention relates to an in vitro method for the differential diagnosis of infections of the central nervous system by herpesvirus, comprising the steps of DNA extraction from a sample of human cerebrospinal fluid; multiplex real-time PCR amplification using the primers as defined in any one of the sequences of SEQ ID NOs: 1 to 12; and identification of the amplicon(s) produced based on the melting temperature (Tm) from high-resolution melting (HRM) curves. The present invention also relates to a kit for the differential diagnosis of infections of the central nervous system by herpesvirus, comprising a combination of primers selected from the group of SEQ ID NOs: 1 to 12; commercial human DNA and water as negative controls; and plasmid DNA containing the viral sequences as positive controls; and reagents for the multiplex real-time PCR reaction. The present invention also relates to the use of a combination of primers selected from the group of SEQ ID NOs: 1 to 12, for the differential diagnosis of infections of the central nervous system by herpesvirus.