Método para diagnóstico ou prognóstico de infecção por htlv-1 e/ou htlv-2, e, kit para diagnóstico de infecção por htlv-1 e/ou htlv-2 por citometria de fluxo

• Main Authors: BRUNO CAETANO TRINDADE, ANNA BÁRBARA DE FREITAS CARNEIRO PROIETTI, VANESSA PERUHYPE MAGALHÃES PASCOAL, JORDANA GRAZZIELA ALVES COELHO DOS REIS, ESTER CERDEIRA SABINO, KELLY ALVES BICALHO CARVALHO, LUIZ CARLOS JÚNIOR ALCÂNTARA, ANDREA TEIXEIRA DE CARVALHO, LUCIENE PIMENTA DE PAIVA, JÚLIA PEREIRA MARTINS, OLINDO ASSIS MARTINS-FILHO
• Format: Patent
• Language: Portuguese
• Published: 08.03.2022
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PHYSICS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; TESTING; VINEGAR; WINE

método para diagnóstico ou prognóstico de infecção por htlv 1 e/ou htlv2, e, kit para diagnóstico de infecção por htlv 1 e/ou htlv2 por citometria de fluxo. a presente invenção se refere a um método para diagnóstico ou prognóstico de infecção por htlv 1 e/ou htlv2, que consiste em (1) coletar amostras de soro de pacientes; (2) preparar células mt-2 e mot para fixação e permeabilização celular e posteriormente marcar células mt-2 e mot; (3) misturar soros de indivíduos humanos e preparação de células mt-2 e mot, com posterior incubação da mistura e lavagem; (4) adicionar anticorpo anti-igg1 biotinilado e sape, com posterior incubação da mistura e lavagem; (5) aplicar as amostras em citômetro de fluxo; (6) analisar perfil de reatividade de anticorpos igg1 anti-htlv-1/2; e (7) avaliar por meio de um algoritmo sincrônico ou assincrônico se há ou não infecção por htlv 1 e/ou htlv2. a presente invenção se refere ainda a um kit para diagnóstico de infecção por htlv 1 e/ou htlv2 por citometria de fluxo que compreende células linfocíticas em suspensão fixadas e marcadas, infectadas por htlv-1 (mt-2) e por htlv-2 (mot); reagente contendo anticorpos anti-igg1 humano biotinilado; amostra de soro de indivíduos humanos não infectados, como controle negativo; amostra de soro de indivíduos humanos infectados por htlv 1 e/ou htlv-2, como controle positivo; e reagente de revelação. The present invention relates to a method for the diagnosis or prognosis of HTLV-1 and/or HTLV-2 infections, involving: (1) collecting samples of serum from patients; (2) preparing MT-2 and MoT cells for cell fixation and permeabilization and subsequently marking MT-2 and MoT cells; (3) mixing serums from human individuals with the preparation of MT-2 and MoT cells, with subsequent incubation of the mixture and washing; (4) adding SAPE and biotinylated anti-IgG1 antibody, with subsequent incubation of the mixture and washing; (5) subjecting the samples to flow cytometry; (6) analyzing the reactivity profile of anti-HTLV-1/2 IgG1 antibodies; and (7) using a synchronous or asynchronous algorithm to determine whether or not there is an HTLV-1 and/or HTLV-2 infection. The present invention also relates to a kit for diagnosing HTLV-1 and/or HTLV-2 infections using flow cytometry, said kit comprising fixed and marked lymphocytic cells in suspension, which are infected by HTLV-1 (MT-2) and HTLV-2 (MoT); a reagent containing biotinylated human anti-IgG1 antibodies; a serum sample from uninfected human individuals as a negative control; a serum sample from human individuals infected with HTLV-1 and/or HTLV-2 as a positive control; and a developing reagent.