Isolation and characterizaion of DNA and protein from endosulfan resistant mutant (endor ) of the cynobacterium anabaena flos-aquae

• Published in: Saudi journal of biological sciences Vol. 8; no. 1; pp. 61 - 69
• Main Authors: Shehata, Afaf Ibrahim, al-Aqil, Fawziyah, Arif, Ibrahim Abd al-Wahid
• Format: Journal Article
• Language: Arabic; English
• Published: Riyadh, Saudi Arabia Saudi Biological Society 2001
• Subjects: Anabaena; Analysis; DNA; Endosulfan; Proteins; الأحماض النووية; الأنابينة; البروتينات
• ISSN: 1319-562X

The present investigation aims to elucidate a general procedure for isolating DNA and its characterization as well as the nitrogen proteins in wild and mutant type. The effect of insecticide endosulfan on growth, pigment analysis and total protein of wild and mutagenized Anabaena jios-aquae had been recently studied (Afaf et al., 2000). Because of the effectiveness of this insecticide on wild and mutant type of most cyanobacteria, it seems interesting to study the influence of endosulfan on DNA and protein content in Anabaena. Plasmid-mediated resistance to Endosulfan (Endd) inAnabaenajios-aquae was suggested in this study. Thus it is important to point out that Endosulfan-resistance has been found to be an efficient selectable marker in genetic engineering field as a good source material for the cloning purposes (Kuhlemier, et al., 1981 and 1983) أجريت هذه الدراسة للمقارنة على المستوى الوراثي و الفسيولوجي في طحلب Anabaena Flos-aquae بين نوعين من الطحلب الطبيعي و المطفر و خاصة فيما يتعلق بالمحتوى البروتيني و الحمض النووي DNA و تحت تأثير مبيد الإندوسلفان بتراكيزه المختلفة. الاختلاف في الاستجابة التأقليمية بين النوعين تم ملاحظتها فقط في تركيز المبيد الذي يمكن احتماله الطحلب. فقد أظهر التركيز العالي من الإندوسلفان (mg / L 11,0) زيادة في بناء البروتين للنوع المطفر أكثر من النوع الطبيعي. أظهرت الدراسة تشابه المحتوى البروتيني للنوعين عند التركيز (mg / L 1,10)، كما أوضحت الدراسة أن أعلى كمية من البروتين (mg / ml 123,38) في التركيز (mg / L 11,0) للنوع المطفر قد أكدت الاستجابة لهذا النوع أكثر من الضابط Control (mg / L 119,44). تطور علم الوراثة الجزيئية للسيانو بكتيريا الخيطية يعتبر محدودا بسبب عدم توفر الطريقة الجيدة لعزل الـ DNA و ذلك لإجراء الدراسات الوراثية مثل نقل الجينات و الكلونة و غيرها. الطريقة التي تم إنجازها في هذه الدراسة نتجت كمية تتراوح ما بين (mg 30-20) في كلا النوعين الطبيعي و المطفر الذي تتناسب مع الوزن الرطب للطحلب و بدوره كان متناسبا مع زمن التحضين و كمية اللاقحة. تمت طريقة العزل معتمدة على الصفات المميزة للطحالب و هي سهولة إنتاجها و عدم تخزين كميات كبيرة من الكربوهيدرات التي قد تعوق عزل الـ DNA لقد تم قياس تركيز الـ DNA في النوعين الطبيعي و المطفر بواسطة جهاز التفريد Gel-electrophresis التحليل بواسطة إنزيمات القطع Hind III تم إجراؤها على الـ DNA للتأكد من الـ DNA الكروموسومي و لحساب الوزن الجزيئي له الذي يتراوح ما بين (Kb 25–20) للنوعين. أستنتج من هذه الدراسة أن المبيد إندوسلفان يؤثر بطريقة إيجابية في بناء البروتين و الحمض النووي الـ DNA لكلا النوعين الطبيعي و المطفر تحت تأثير تراكيز مختلفة مما أدى إلى اقتراح وجود البلازميدات Endor كوسيط لمقاومة المبيد.