家蝇GNBP3基因克隆及感染白色念珠菌后的表达

• Published in: 环境昆虫学报 Vol. 39; no. 3; pp. 596 - 604
• Main Author: 胡亚 罗嫚 王宇 王涛 尚小丽 张迎春 修江帆 吴建伟
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 2017
• Subjects: GNBP3; mRNA水平; 实时荧光定量PCR; 家蝇; 感染
• ISSN: 1674-0858

对家蝇GNBP3基因进行克隆及生物信息学分析,并对该基因在感染白色念珠菌Candida albicans后的表达情况进行研究。从构建的家蝇Musca domestica幼虫c DNA质粒文库中筛选到GNBP3基因,克隆并运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。白色念珠菌注射感染家蝇幼虫并收集标本,逆转录,通过荧光定量PCR检测感染样本中GNBP3基因的表达情况,结果进行统计学分析。研究结果表明,GNBP3基因ORF全长1473 bp,编码490个氨基酸,理论分子量为55.8 k Da,等电点为6.85;感染后不同时间点,感染组与对照组比较,在3 h、12 h、36 h、48 h GNBP3 mRNA的表达明显增高,两组比较有显著性差异（P〈0.05）,而24 h表达差异性最小;感染后不同组织中感染组与对照组比较,3 h和12 h时,在体壁、血淋巴、脂肪体中的表达量升高,具有显著性差异（P〈0.05）;24 h时,在血淋巴中的表达量较对照组高,而在唾液腺和脂肪体中的表达量呈下降趋势,均具有显著性差异（P〈0.05）;48 h,在血淋巴和脂肪体中表达量较对照组高,在中肠的表达量较对照组低,均具有显著性差异（P〈0.01）。成功克隆GNBP3基因且在家蝇感染白色念珠菌后GNBP3的表达水平随时间的推移呈现先升高后降低再升高的趋势,在各组织中以在免疫组织（血淋巴、脂肪体）中的表达显著增高,推测其在真菌识别过程中发挥潜在作用。