一个调控抗菌肽表达的小菜蛾肽聚糖识别蛋白（PxPGRP-SA）

• Published in: 昆虫学报 Vol. 59; no. 5; pp. 489 - 499
• Main Author: 郑志华 许小霞 余静 高延富 张玉清 欧阳莉娜 金丰良
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 2016
• Subjects: RNAi; 小菜蛾; 抗菌肽表达; 抗血清; 肽聚糖识别蛋白
• ISSN: 0454-6296

【目的】肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition proteins,PGRPs）是昆虫免疫系统中一类重要的模式识别蛋白。本研究旨在阐明经苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis侵染后,小菜蛾Plutella xylostella PGRP-SA基因（命名为Px PGRP-SA）在体内的表达模式和对抗菌肽基因的表达调控。【方法】本研究利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析B.thuringiensis侵染小菜蛾幼虫后Px PGRP-SA的转录模式,通过RNAi技术结合抗血清封闭实验检测Px PGRP-SA对小菜蛾抗菌肽基因的表达调控作用。【结果】qRT-PCR检测表明,小菜蛾4龄幼虫在注射具有活性的B.thuringiensis 6 h后,Px PGRP-SA在脂肪体和血细胞中表达量迅速上升,其中脂肪体中的表达量在注射24 h后达到高峰,而在血细胞中的表达量在18 h后达到高峰。RNAi沉默小菜蛾4龄幼虫Px PGRP-SA的转录后,可显著降低小菜蛾脂肪体中cecropin,moricin-2,lysozyme和defensin 4个抗菌肽基因及Dorsal和Sptzle基因的mRNA转录水平;注射anti-Px PGRP-SA封闭小菜蛾体内Px PGRP-SA的活性后,也可降低小菜蛾脂肪体中4个抗菌肽基因的mRNA转录水平;Px PGRP-SA转录沉默后,同时导致添食B.thuringiensis的小菜蛾幼虫的存活率明显降低。【结论】Px PGRP-SA参与了小菜蛾体内抗菌肽cecropin,moricin-2,lysozyme和defensin基因的表达调控,并在免疫防御B.thuringiensis的侵染过程中起了重要的作用。