两种荧光标记物对中枢神经系统内源性神经干细胞的标记效果比较

• Published in: 解放军医学杂志 Vol. 37; no. 9; pp. 843 - 848
• Main Author: 谭波涛 虞璟 刘媛 伍亚民 龙在云 贾功伟 虞乐华
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 2012
• Subjects: DAPI; DIL; 中枢神经系统; 干细胞; 荧光抗体技术
• ISSN: 0577-7402

目的观察DIL和DAPI两种不同的标记物对中枢神经系统内源性神经干细胞的标记效果。方法清洁级健康成年SD大鼠36只,随机分为实验组（DIL组,DAPI组）和对照组（DMSO组,PBS组）。使用立体定位仪,向实验组大鼠侧脑室注入0.2%DIL或10μg/ml DAPI各10μl,对照组大鼠侧脑室相应注入DMSO或PBS各10μl。注射后2h和24h对动物进行神经功能损伤评分（NSS）。采用激光共聚焦显微镜观察注射后1、3、7d脑室及脊髓颈、胸、腰段室管膜细胞的荧光标记情况,对目标区域荧光强度进行半定量分析,并对不同组别和时间点的脑室及脊髓标本测定结果进行比较。结果注射DIL及DAPI后2h,大鼠NSS评分很低,与相应对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）,24h后基本恢复正常。DIL注射后1d,侧脑室及各节段的脊髓室管膜细胞胞质均显示红色荧光,一直持续到注射后7d。DAPI注射后1d,侧脑室内标记的细胞核形态清晰,呈蓝色,脑室脉络丛大量细胞亦可见蓝色荧光标记,但脊髓各节段室管膜区的细胞均未见蓝色荧光,注射后3、7d的情况与1d类似。两种试剂标记后,目标区域内各时间点的荧光强度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 DIL可对内源性神经干细胞的细胞质进行标记,适合作为侧脑室和脊髓室管膜内源性神经干细胞的标记物。DAPI可标记细胞核,适合用于侧脑室内源性神经干细胞的标记。脑室注射荧光染料对动物影响小,是一项相对安全的操作。