基于表面等离子体共振的外泌体PD-L1蛋白检测技术

Q816; 血清中可溶性程序性死亡-配体1(programmed cell death 1 ligand 1,PD-L1)蛋白的存在形式包括外泌体表面、微囊泡表面以及分泌的游离形式等.前期研究表明,血清中外泌体表面PD-L1含量与多种癌症的预后评估显著相关,然而目前的常规检测方法通常将血清中所有可溶性PD-L1蛋白作为一个整体进行检测,无法有效分辨外泌体PD-L1与其他形式的PD-L1.本研究基于表面等离子体共振技术,建立了一种外泌体PD-L1的特异性检测方法.该方法首先通过抗体识别PD-L1蛋白,并将其捕获至检测芯片表面;再利用α-溶血素在外泌体膜上形成多个寡聚体,从而特异性检测外泌体PD-...

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Published in中国生物化学与分子生物学报 Vol. 40; no. 9; pp. 1300 - 1307
Main Authors 屈丽思, 彭宇彦, 俞泽涛, 叶子弘, 夏文强
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 浙江大学农业与生物技术学院现代种业研究所,杭州 310058 20.09.2024
中国计量大学生命科学学院,浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室,杭州 310018%中国计量大学生命科学学院,浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室,杭州 310018
Subjects
α-hemolysin
programmed cell death 1 ligand 1(PD-L1)
α-溶血素
外泌体
生物标志物
biomarker
exosome
程序性死亡-配体1
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Summary:Q816; 血清中可溶性程序性死亡-配体1(programmed cell death 1 ligand 1,PD-L1)蛋白的存在形式包括外泌体表面、微囊泡表面以及分泌的游离形式等.前期研究表明,血清中外泌体表面PD-L1含量与多种癌症的预后评估显著相关,然而目前的常规检测方法通常将血清中所有可溶性PD-L1蛋白作为一个整体进行检测,无法有效分辨外泌体PD-L1与其他形式的PD-L1.本研究基于表面等离子体共振技术,建立了一种外泌体PD-L1的特异性检测方法.该方法首先通过抗体识别PD-L1蛋白,并将其捕获至检测芯片表面;再利用α-溶血素在外泌体膜上形成多个寡聚体,从而特异性检测外泌体PD-L1.该方法通过α-溶血素结合过程的信号变化对外泌体PD-L1含量进行检测,可以有效降低检测背景噪音并放大信号.使用α-溶血素放大信号前的线性范围为0.035～2.208 pg/mL,信号放大后的线性范围为0.004-0.552 pg/mL.方法学验证实验表明,该方法特异性、灵敏度和精密度良好,具有一定的临床应用前景.
ISSN:1007-7626
DOI:10.13865/j.cnki.cjbmb.2024.07.1136