基于胆固醇-DNA的活细胞膜修饰研究

Q2-33; 目的·探讨连接胆固醇的脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)对活细胞膜的修饰作用.方法·以悬浮细胞L1210和贴壁细胞PC-12为研究对象,将每种细胞分为实验组(胆固醇-DNA孵育)和对照组(磷酸盐缓冲液处理).通过共聚焦显微镜获得2组细胞的荧光强度,并对实验组细胞进行三维重构.采用扫描电子显微镜观察实验组细胞的形态.采用荧光漂白恢复实验检测胆固醇-DNA修饰对细胞膜流动性的影响.结果·悬浮细胞和贴壁细胞获得了一致的结果.与对照组相比,实验组细胞表面的荧光强度有所加强(均P=0.000).共聚焦显微镜的三维重构显示,实验组细胞的荧光分布在整个细胞表面....

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Published in上海交通大学学报（医学版） Vol. 39; no. 9; pp. 969 - 974
Main Authors 刘江波, 王丽华, 左小磊
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国科学院上海应用物理研究所物理生物学研究室,上海光源生物成像中心,上海 201800 28.09.2019
中国科学院大学,北京 100049%中国科学院上海应用物理研究所物理生物学研究室,上海光源生物成像中心,上海 201800%上海交通大学医学院分子医学研究院,上海交通大学医学院附属仁济医院,上海 200127
Subjects
细胞膜
修饰
脱氧核糖核酸
胆固醇
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Summary:Q2-33; 目的·探讨连接胆固醇的脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)对活细胞膜的修饰作用.方法·以悬浮细胞L1210和贴壁细胞PC-12为研究对象,将每种细胞分为实验组(胆固醇-DNA孵育)和对照组(磷酸盐缓冲液处理).通过共聚焦显微镜获得2组细胞的荧光强度,并对实验组细胞进行三维重构.采用扫描电子显微镜观察实验组细胞的形态.采用荧光漂白恢复实验检测胆固醇-DNA修饰对细胞膜流动性的影响.结果·悬浮细胞和贴壁细胞获得了一致的结果.与对照组相比,实验组细胞表面的荧光强度有所加强(均P=0.000).共聚焦显微镜的三维重构显示,实验组细胞的荧光分布在整个细胞表面.扫描电子显微镜结果显示,实验组细胞的形态经胆固醇-DNA修饰后并未改变.经荧光漂白处理后,实验组L1210细胞的相对荧光强度下降至0.090,且在110 s内恢复至0.860.结论·胆固醇-DNA能够对整个活细胞膜进行修饰,且修饰后的细胞膜仍具有流动性.该方法不仅能够用于悬浮细胞,还可应用于贴壁细胞.
ISSN:1674-8115
DOI:10.3969/j.issn.1674-8115.2019.09.006