蜈蚣毒液中钾离子通道Kv4.1抑制剂SsTx-P2的分离和结构鉴定

Q95; 目的:挖掘蜈蚣毒液中的电压门控钾离子通道Kv4.1多肽抑制剂,确定其一级结构,并对其空间结构进行建模分析.方法:利用离子交换层析和反相高效液相色谱对蜈蚣毒液的多肽组分进行分离纯化,通过全细胞膜片钳技术鉴定能够抑制Kv4.1通道的多肽;运用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱鉴定多肽的分子量,借助Edman降解测序和二维质谱测序确定多肽的一级结构;基于迭代线程装配细化在线分析建立多肽空间结构模型.结果:从蜈蚣毒液中分离纯化得到一条能够抑制Kv4.1通道的多肽SsTx-P2,分子量为6122.8,氨基酸序列为NH2-ELTWDFVRTCCKLFPDKSECTKACATEFTGGDESRLK...

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Published in浙江大学学报（医学版） Vol. 53; no. 2; pp. 194 - 200
Main Authors 杜灿伟, 袁复楚, 段心怡, 容明强, 孟尔, 刘长军
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 湖南科技大学生命科学与健康学院,湖南 湘潭 411201%湖南师范大学生命科学学院,湖南 长沙 410006 25.04.2024
Subjects
Kv4.1 channel inhibitor
钾离子通道
多肽
蜈蚣
Centipede
Structure
Peptide
Potassium channel
Kv4.1通道抑制剂
结构
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Summary:Q95; 目的:挖掘蜈蚣毒液中的电压门控钾离子通道Kv4.1多肽抑制剂,确定其一级结构,并对其空间结构进行建模分析.方法:利用离子交换层析和反相高效液相色谱对蜈蚣毒液的多肽组分进行分离纯化,通过全细胞膜片钳技术鉴定能够抑制Kv4.1通道的多肽;运用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱鉴定多肽的分子量,借助Edman降解测序和二维质谱测序确定多肽的一级结构;基于迭代线程装配细化在线分析建立多肽空间结构模型.结果:从蜈蚣毒液中分离纯化得到一条能够抑制Kv4.1通道的多肽SsTx-P2,分子量为6122.8,氨基酸序列为NH2-ELTWDFVRTCCKLFPDKSECTKACATEFTGGDESRLKDVWPRKLRSGDSRLKD-OH,其在1.0 μmol/L浓度下能够抑制Kv4.1通道超过95%的电流.空间结构模型显示,多肽SsTx-P2拥有一个保守的螺旋结构.结论:本文通过分离纯化从蜈蚣毒液中得到一条多肽SsTx-P2,能够强效抑制钾离子通道Kv4.1,其空间结构具有一定的保守性.
ISSN:1008-9292
DOI:10.3724/zdxbyxb-2023-0430