千金子制霜前后提取物对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响研究

• Published in: 北京中医药大学学报 Vol. 46; no. 6; pp. 780 - 789
• Main Authors: 王慧楠, 姜明瑞, 王志成, 岳珠珠, 魏晓彤, 王梦琳, 石双慧, 张婧秋, 陈梦雨, 刘芊芊, 王英姿
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 北京中医药大学中药学院 北京 102488 01.06.2023
• Subjects: 千金子; 制霜减毒; 小鼠; TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路; 炎性反应
• ISSN: 1006-2157
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2157.2023.06.008

R285.5; 目的 研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体 4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异.方法 42 只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组,千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg)和千金子霜品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg),每组6 只,连续灌胃7 d.酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织TLR4、NF-κB p65、NLRP3 蛋白和mRNA表达.30 只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组、千金子生品组、千金子生品+TAK-242 组、千金子霜品组、千金子霜品+TAK-242 组,每组6 只.各给药组灌胃相应药液(20.98 g/kg),连续 7 d,千金子生品+TAK-242 组和千金子霜品+TAK-242 组于给药第1、5、6、7 天给药前30 min腹腔注射TAK-242 溶液(3mg/kg).采用蛋白质印迹法和实时荧光 PCR 法检测结肠组织 NLRP3、NF-κB p65 蛋白表达,以及 NLRP3、IL-1β mRNA表达.结果 千金子生品可导致IL-1β和TNF-α大量释放,上调TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01),千金子制霜后对IL-1β、TNF-α分泌,以及TLR4、NF-κB p65、NLRP3 蛋白和mRNA表达的促进作用减弱(P<0.05,P<0.01).加入TLR4 的阻断剂TAK-242 后,可抑制NLRP3、NF-κB p65 蛋白表达,以及NLRP3、IL-1β mRNA表达(P<0.01).结论 千金子生品可能通过激活TLR4 介导的NF-κB/NLRP3 通路,促进TNF-α和IL-1β释放,诱导结肠组织产生炎性反应,而制霜后对TLR4/NF-κB/NLRP3 通路传导及促炎因子分泌的上调作用明显减弱,提示其制霜减毒的作用机制可能与致炎能力下降及干预TLR4/NF-κB/NLRP3 信号通路有关.