下调HMGB2表达对肝癌LM3细胞上皮-间质转化的抑制作用及其AKT/mTOR信号通路机制

R735.7; 目的:探讨下调肝癌细胞中高迁移率族框蛋白2(HMGB2)表达对肝癌细胞生物学行为及上皮-间质转化(EMT)进程的影响,并阐明其作用机制.方法:对数生长期的人肝癌LM3细胞分为阴性对照组和HMGB2 RNA干扰组(HMGB2 siRNA组),分别以Lipofectamin 2000为载体转染无关序列的RNA 寡核苷酸(RNA oligo)和敲除HMGB2序列的RNA oligo.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测2组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平,分别采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力...

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Published in吉林大学学报(医学版) Vol. 50; no. 1; pp. 143 - 149
Main Authors 魏雁虹, 杨晨雪, 杨广民, 宋帅, 李明, 杨海娇, 魏海峰
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 吉林省人民医院医学检验中心,吉林 长春 130021%吉林省人民医院生物治疗与基因诊断重点实验室,吉林 长春 130021 28.01.2024
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Summary:R735.7; 目的:探讨下调肝癌细胞中高迁移率族框蛋白2(HMGB2)表达对肝癌细胞生物学行为及上皮-间质转化(EMT)进程的影响,并阐明其作用机制.方法:对数生长期的人肝癌LM3细胞分为阴性对照组和HMGB2 RNA干扰组(HMGB2 siRNA组),分别以Lipofectamin 2000为载体转染无关序列的RNA 寡核苷酸(RNA oligo)和敲除HMGB2序列的RNA oligo.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测2组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平,分别采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力,采用Western blotting法检测2组细胞中 E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和蛋白激酶 B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达水平.结果:与阴性对照组比较,HMGB2 siRNA组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),HMGB2 siRNA 组细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin、mTOR、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01).结论:下调HMGB2的表达可降低肝癌LM3细胞迁移和侵袭能力并抑制EMT,其作用机制可能与参与调节AKT/mTOR通路相关蛋白表达有关.
ISSN:1671-587X
DOI:10.13481/j.1671-587X.20240118