羟基脲联合辐射对沉默ATRX后细胞周期及凋亡的影响

• Published in: 吉林大学学报（医学版） Vol. 49; no. 3; pp. 590 - 598
• Main Authors: 田宏远, 尹彩云, 王丽, 胡沛芸, 张晨阳, 李秋月, 郑清照, 齐亚莉, 方芳, 王志成
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 吉林大学公共卫生学院 国家卫健委放射生物学重点实验室,吉林 长春 130021%吉林大学公共卫生学院%吉林医药学院公共卫生学院流行病学教研室,吉林 吉林 132013 28.05.2023
• Subjects: 细胞凋亡; 电离辐射; 细胞周期阻滞; 羟基脲; α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关蛋白
• ISSN: 1671-587X
• DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230306

R749.94; 目的:探讨羟基脲(HU)联合辐射对沉默α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关蛋白(ATRX)后A549细胞周期和凋亡的影响,并阐明其可能的分子机制.方法:建立稳定沉默ATRX的A549 细胞模型(shATRX-A549),荧光显微镜下观察细胞感染情况,采用Western blotting法检测沉默ATRX细胞中ATRX蛋白表达量验证细胞模型,以shNC-A549细胞作为阴性对照.实验分为对照组、HU组、辐射组(给予8 Gy X射线辐射)和 HU+辐射组(给予HU+8 Gy X射线辐射).流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率,采用RNA测序(RNA-seq)检测沉默ATRX后各组细胞中mRNA表达,采用Western blotting法检测各组细胞中细胞分裂周期因子(CDC25B)、细胞周期蛋白(Cyclin)B1和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)蛋白表达量.结果:荧光显微下可见shNC-A549和shATRX-A549细胞表达绿色荧光蛋白(GFP);Western blotting法检测,与shNC-A549细胞比较,shATRX-A549细胞中ATRX蛋白表达量明显减少.流式细胞术检测,与对照组比较,HU组shNC-A549细胞中G0/G1期细胞百分率升高(P<0.05),S期和G2/M期细胞百分率明显降低(P<0.05或P<0.01);辐射组shNC-A549细胞中G0/G1期和S期细胞百分率明显降低(P<0.01),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.01);HU+辐射组shNC-A549细胞中G0/G1 期细胞百分率明显降低(P<0.01),S期和G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.01);与对照组比较,HU组shATRX-A549细胞中G0/G1期细胞百分率升高(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显降低(P<0.01);辐射组shATRX-A549细胞中G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.01),G0/G1期和S期细胞百分率明显降低(P<0.01);HU+辐射组shATRX-A549细胞中G0/G1 期细胞百分率明显降低(P<0.01),S期和G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.01);与shNC-A549 细胞比较,辐射组shATRX-A549细胞中G0/G1 期细胞百分率升高(P<0.05),G2/M期细胞百分率降低(P<0.05);HU+辐