苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响

• Published in: 吉林大学学报（医学版） Vol. 50; no. 2; pp. 320 - 325
• Main Authors: 刘玥欣, 来永巍, 王艳春, 徐博, 路倩, 安英, 任旷, 范红艳
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 吉林医药学院药学院药理学教研室,吉林 吉林 132013%吉林医药学院基础医学院机能实验室,吉林 吉林 132013 28.03.2024
• Subjects: 苦参总黄酮; Oxidative stress; KELCH状ECH相关蛋白1; Lead acetate; Kelch-like ECH-associated protein 1; 核因子E2相关因子2; Leydig's cell; 氧化应激; 睾丸间质细胞; 醋酸铅; Sophoral flavones; Nuclear factor erythroid 2-related factor 2
• ISSN: 1671-587X
• DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240204

R96; 目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3 细胞氧化应激的相关作用机制.方法:利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80 μmol·L-1)LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L-1)SF分别干预 24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组.除空白对照组外,其他各组均采用50 μmol·L-1 LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L-1 SF.利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 9(Caspase-9)蛋白表达水平.结果:MTT法检测,与 0 μmol·L-1 LA组比较,10、20、50和80 μmol·L-1 LA组TM3 细胞存活率明显降低(P<0.01);与 0 mg·L-1 SF组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L-1 SF组TM3细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01);与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P<0.01);WST-1法和TBA法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01);Western blotting法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达