大黄酚对H2O2诱导EA.hy926细胞凋亡的改善作用及其机制

• Published in: 吉林大学学报（医学版） Vol. 50; no. 6; pp. 1512 - 1518
• Main Authors: 李思琪, 陈广道, 曾其毅
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 南方医科大学珠江医院儿科,广东 广州 510282%广东省妇幼保健院儿科,广东 广州 511400%南方医科大学珠江医院儿科,广东 广州 510282 28.11.2024; 暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院神经生物学系,广东 广州 510632
• Subjects: 细胞凋亡; 核转位; Oxidative stress; Nuclear translocation; 氧化应激; Apoptosis-inducing factor; 凋亡诱导因子; Bronchopulmonary dysplasia; 支气管肺发育不良; Chrysophanol; 大黄酚; Apoptosis
• ISSN: 1671-587X
• DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240604

R725.6; 目的:探讨大黄酚对过氧化氢(H2O2)诱导EA.hy926细胞氧化损伤的作用,并阐明其对支气管肺发育不良(BPD)的治疗作用及其相关机制.方法:分别采用25、50、100、200、400、800和1 600 μmol·L-1 H2O2及0、8、16、32、64、128和256 μmol·L-1大黄酚诱导EA.hy926细胞,CCK-8法检测不同浓度H2O2和大黄酚处理后EA.hy926细胞活性.将细胞分为对照组、模型组(200 μmol·L-1 H2O2)、低剂量大黄酚组(8 μmol·L-1大黄酚和200 μmol·L-1 H2O2)和高剂量大黄酚组(256 μmol·L-1大黄酚和200 μmol·L-1 H2O2).Western blotting法检测各组细胞质和细胞核中凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组细胞AIF核转位情况,试剂盒检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-8及Caspase-9水平.结果:不同浓度H2O2 作用下,EA.hy926细胞呈倒置S形细胞活性曲线,细胞活性良好,半数抑制浓度(IC50)为261.52 μmol·L-1,采用200 μmol·L-1 H2O2 干预24 h诱导建立细胞模型.随着大黄酚药物浓度升高,EA.hy926细胞活性无明显变化(P>0.05),采用 8和 256 μmol·L-1 大黄酚进行细胞干预.Western blotting法检测,与对照组比较,模型组细胞核中AIF蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞质中AIF蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞核中AIF蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),细胞质中AIF蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).免疫荧光法检测,对照组细胞AIF定位于细胞核内较少;与对照组比较,模型组细胞AIF核转位阳性值明显升高(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞AIF核转位阳性值均明显降低(P<0.05).与对照组比较,模型组细胞中SOD活性明显降低(P<0.05),MDA水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞中SOD活性均明显升高(P<0.05),MDA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);各组细胞中Caspase-8和Caspas