血管软化丸调控lncRNA-TUG1防治动脉粥样硬化的分子机制
R285.5; 目的 观察血管软化丸调控长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA-TUG1)抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路活化及血管炎症反应的分子机制.方法 体内实验:采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化小鼠模型.按照随机数字表法将75只ApoE-/-小鼠分为模型组、牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制剂组(10μL TUG1干扰慢病毒)、阴性对照组(10μL空载慢病毒)、血管软化丸组(43.2 g/kg)、联合组(10μL TUG1干扰慢病毒+43.2 g/kg血管软化丸),每组各15只,连续干预8周.采用免疫组化法检测各组小鼠主动脉TUG1的蛋白表达;酶联免疫吸附测定...
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| Published in | 北京中医药大学学报 Vol. 46; no. 3; pp. 366 - 376 |
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| Main Authors | , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Chinese |
| Published |
河南中医药大学第二附属医院 郑州450002
01.03.2023
|
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1006-2157 |
| DOI | 10.3969/j.issn.1006-2157.2023.03.013 |
Cover
| Abstract | R285.5; 目的 观察血管软化丸调控长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA-TUG1)抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路活化及血管炎症反应的分子机制.方法 体内实验:采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化小鼠模型.按照随机数字表法将75只ApoE-/-小鼠分为模型组、牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制剂组(10μL TUG1干扰慢病毒)、阴性对照组(10μL空载慢病毒)、血管软化丸组(43.2 g/kg)、联合组(10μL TUG1干扰慢病毒+43.2 g/kg血管软化丸),每组各15只,连续干预8周.采用免疫组化法检测各组小鼠主动脉TUG1的蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠外周血清中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;实时荧光PCR法检测各组小鼠主动脉TUG1、p38总蛋白(T-p38)的mRNA表达水平.体外实验:建立血管内皮细胞(VEC)功能紊乱模型,采用血管软化丸含药血清进行干预.干预后采用MTT法检测细胞存活率;透射电镜观察细胞超微结构;ELISA法检测细胞液中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1的含量;实时荧光PCR法检测细胞TUG1、T-p38的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测细胞T-p38、磷酸化p38(p-p38)蛋白表达水平.结果 体内实验发现,免疫组化结果显示,TUG1蛋白表达阳性信号为棕黄色或棕褐色,模型组和阴性对照组的动脉粥样硬化斑块形成明显,且TUG1蛋白表达阳性信号强;与模型组相比,血管软化丸组主动脉TUG1平均光密度降低(P<0.05),外周血清中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1含量降低(P<0.05),主动脉TUG1和T-p38 mRNA表达水平降低(P<0.05).体外实验发现,与模型组相比,血管软化丸血清组的VEC细胞存活率升高(P<0.05);透射电镜显示,血管软化丸血清组细胞内线粒体间距离较模型组小,细胞内纤维排列较模型组整齐;血管软化丸血清组细胞液中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1含量降低(P<0.05),细胞TUG1和T-p38 mRNA表达水平降低(P<0.05),细胞T-p38、p-p38蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 血管软化丸防治动脉粥样硬化的分子机制可能 |
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| AbstractList | R285.5; 目的 观察血管软化丸调控长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA-TUG1)抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路活化及血管炎症反应的分子机制.方法 体内实验:采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化小鼠模型.按照随机数字表法将75只ApoE-/-小鼠分为模型组、牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制剂组(10μL TUG1干扰慢病毒)、阴性对照组(10μL空载慢病毒)、血管软化丸组(43.2 g/kg)、联合组(10μL TUG1干扰慢病毒+43.2 g/kg血管软化丸),每组各15只,连续干预8周.采用免疫组化法检测各组小鼠主动脉TUG1的蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠外周血清中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;实时荧光PCR法检测各组小鼠主动脉TUG1、p38总蛋白(T-p38)的mRNA表达水平.体外实验:建立血管内皮细胞(VEC)功能紊乱模型,采用血管软化丸含药血清进行干预.干预后采用MTT法检测细胞存活率;透射电镜观察细胞超微结构;ELISA法检测细胞液中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1的含量;实时荧光PCR法检测细胞TUG1、T-p38的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测细胞T-p38、磷酸化p38(p-p38)蛋白表达水平.结果 体内实验发现,免疫组化结果显示,TUG1蛋白表达阳性信号为棕黄色或棕褐色,模型组和阴性对照组的动脉粥样硬化斑块形成明显,且TUG1蛋白表达阳性信号强;与模型组相比,血管软化丸组主动脉TUG1平均光密度降低(P<0.05),外周血清中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1含量降低(P<0.05),主动脉TUG1和T-p38 mRNA表达水平降低(P<0.05).体外实验发现,与模型组相比,血管软化丸血清组的VEC细胞存活率升高(P<0.05);透射电镜显示,血管软化丸血清组细胞内线粒体间距离较模型组小,细胞内纤维排列较模型组整齐;血管软化丸血清组细胞液中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1含量降低(P<0.05),细胞TUG1和T-p38 mRNA表达水平降低(P<0.05),细胞T-p38、p-p38蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 血管软化丸防治动脉粥样硬化的分子机制可能 |
| Author | 秦合伟 王梦楠 李彦杰 孙孟艳 |
| AuthorAffiliation | 河南中医药大学第二附属医院 郑州450002 |
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| Discipline | Medicine |
| DocumentTitle_FL | Molecular mechanism of vascular softening pill regulating lncRNA-TUG1 to prevent atherosclerosis |
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| Issue | 3 |
| Keywords | 长链非编码RNA牛磺酸上调基因1 血管软化丸 小鼠 血管内皮细胞 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路 炎症反应 |
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| PublicationTitle | 北京中医药大学学报 |
| PublicationTitle_FL | Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine |
| PublicationYear | 2023 |
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