血管软化丸调控lncRNA-TUG1防治动脉粥样硬化的分子机制

• Published in: 北京中医药大学学报 Vol. 46; no. 3; pp. 366 - 376
• Main Authors: 秦合伟, 李彦杰, 孙孟艳, 王梦楠
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 河南中医药大学第二附属医院 郑州450002 01.03.2023
• Subjects: 长链非编码RNA牛磺酸上调基因1; 血管软化丸; 小鼠; 血管内皮细胞; p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路; 炎症反应
• ISSN: 1006-2157
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2157.2023.03.013

R285.5; 目的 观察血管软化丸调控长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA-TUG1)抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路活化及血管炎症反应的分子机制.方法 体内实验:采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化小鼠模型.按照随机数字表法将75只ApoE-/-小鼠分为模型组、牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制剂组(10μL TUG1干扰慢病毒)、阴性对照组(10μL空载慢病毒)、血管软化丸组(43.2 g/kg)、联合组(10μL TUG1干扰慢病毒+43.2 g/kg血管软化丸),每组各15只,连续干预8周.采用免疫组化法检测各组小鼠主动脉TUG1的蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠外周血清中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;实时荧光PCR法检测各组小鼠主动脉TUG1、p38总蛋白(T-p38)的mRNA表达水平.体外实验:建立血管内皮细胞(VEC)功能紊乱模型,采用血管软化丸含药血清进行干预.干预后采用MTT法检测细胞存活率;透射电镜观察细胞超微结构;ELISA法检测细胞液中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1的含量;实时荧光PCR法检测细胞TUG1、T-p38的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测细胞T-p38、磷酸化p38(p-p38)蛋白表达水平.结果 体内实验发现,免疫组化结果显示,TUG1蛋白表达阳性信号为棕黄色或棕褐色,模型组和阴性对照组的动脉粥样硬化斑块形成明显,且TUG1蛋白表达阳性信号强;与模型组相比,血管软化丸组主动脉TUG1平均光密度降低(P<0.05),外周血清中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1含量降低(P<0.05),主动脉TUG1和T-p38 mRNA表达水平降低(P<0.05).体外实验发现,与模型组相比,血管软化丸血清组的VEC细胞存活率升高(P<0.05);透射电镜显示,血管软化丸血清组细胞内线粒体间距离较模型组小,细胞内纤维排列较模型组整齐;血管软化丸血清组细胞液中ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1含量降低(P<0.05),细胞TUG1和T-p38 mRNA表达水平降低(P<0.05),细胞T-p38、p-p38蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 血管软化丸防治动脉粥样硬化的分子机制可能