组蛋白去乙酰化酶抑制剂CUDC-101对前列腺癌DU145细胞DNA损伤、迁移和上皮-间质转化的影响

• Published in: 吉林大学学报（医学版） Vol. 50; no. 2; pp. 400 - 410
• Main Authors: 那佈其, 权春姬, 赵芳, 杨凡, 肖茹, 金雪梅, 李珍玲
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 延边大学附属医院病理科,吉林 延吉 133000 28.03.2024; 健康产业集团铁煤总医院病理科,辽宁 调兵山 112700%延边大学附属医院病理科,吉林 延吉 133000
• Subjects: Prostate neoplasm; Epithelial-mesenchymal transition; DNA损伤; 泛素化组蛋白; Histone H2A family member X; DNA damage; CUDC-101; 前列腺肿瘤; 上皮-间质转化
• ISSN: 1671-587X
• DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240213

R737.2; 目的:探讨泛素化组蛋白(H2AX)在前列腺癌(PCa)和癌旁良性前列腺组织中的表达及与其PCa患者临床病理参数之间的关系,阐明新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)CUDC-101对PCa的DNA损伤、迁移及上皮-间质转化(EMT)的影响.方法:肿瘤基因组谱(TCGA)数据库和UALCAN数据库检索各种癌症组织中H2AX mRNA的表达情况及其在PCa与正常前列腺组织中的表达差异,分析其表达与PCa患者临床预后的关系;采用免疫组织化学染色法检测在PCa组织和癌旁良性前列腺组织中H2AX蛋白的表达情况,分析H2AX蛋白表达与PCa患者临床病理参数的关系;体外培养DU145细胞,分为对照组、5%FBS组、5%FBS+100 μmol·L-1 CUDC-101组和 5%FBS+ 200 μmol·L-1 CUDC-101 组,采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测CUDC-101 处理前后PCa DU145细胞的细胞划痕面积及迁移细胞数;免疫荧光染色法检测CUDC-101处理后PCa DU145细胞中上皮细胞标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)和磷酸化组蛋白 γ-H2AX 表达情况;Western blotting法检测CUDC-101处理后EMT相关蛋白、γ-H2AX和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)表达情况.结果:TCGA数据库和UALCAN数据库分析,H2AX mRNA在PCa组织中高表达,并且H2AX低表达组患者的无病生存期(DFS)明显高于H2AX mRNA高表达组(P<0.001);免疫组织化学染色,在PCa组织中H2AX蛋白强阳性表达率高于在癌旁良性前列腺组织(64.34%vs 14.29%),其过表达与PCa的T分期(P=0.001)和世界卫生组织/国际泌尿科病理学会(WHO/ISUP)预后分级分组(P=0.004)有关,但与PCa患者的年龄、Gleason评分、淋巴结转移、神经和脉管浸润无关(P>0.05);免疫荧光染色法检测,与对照组和EMT诱导组比较,CUDC-101 处理组E-cadherin和γ-H2AX蛋白的荧光表达增强;细胞划痕实验和Transwell小室实验检测,与对照组比较,CUDC-101处理组DU145细胞愈合面积和迁移细胞数明显下调;Western blotting法检测,与EMT诱导组比较,CUDC-101 处理组 E-cadherin 和 γ-H