基于B646L、EP402R、MGF360/505基因的非洲猪瘟病毒ERA检测方法的建立

S852.651; [目的] 建立一种基于酶促重组酶扩增(Enzymatic recombinase amplification,ERA)技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) DNA快速检测方法. [方法] 参考ASFV B646L基因、EP402R基因和多基因家族成员MGF360/505基因保守序列,设计特异性的ERA探针和引物,经过反应条件的优化,建立42 ℃等温条件下检测ASFV DNA的ERA方法. [结果] ERA-ASFV-B646L、ERA-ASFV-EP402R和ERA-ASFV-MGF 3个检测方法分别在16、7和13 min内即...

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Published in华南农业大学学报 Vol. 42; no. 5; pp. 33 - 40
Main Authors 曾宇晨, 龚浪, 王京煜, 潘昊鸣, 梁杏玲, 马俊, 张桂红, 王衡
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 华南农业大学国家生猪种业工程技术研究中心,广东 广州 510642 01.09.2021
华南农业大学 兽医学院/广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室,广东 广州 510642%国家非洲猪瘟区域实验室(广州)/华南农业大学 非洲猪瘟防控技术研究中心,广东 广州 510642%华南农业大学 兽医学院/广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室,广东 广州 510642
国家非洲猪瘟区域实验室(广州)/华南农业大学 非洲猪瘟防控技术研究中心,广东 广州 510642
Subjects
等温扩增
快速检测
非洲猪瘟
酶促重组酶扩增
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ISSN1001-411X
DOI10.7671/j.issn.1001-411X.202101031

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Summary:S852.651; [目的] 建立一种基于酶促重组酶扩增(Enzymatic recombinase amplification,ERA)技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) DNA快速检测方法. [方法] 参考ASFV B646L基因、EP402R基因和多基因家族成员MGF360/505基因保守序列,设计特异性的ERA探针和引物,经过反应条件的优化,建立42 ℃等温条件下检测ASFV DNA的ERA方法. [结果] ERA-ASFV-B646L、ERA-ASFV-EP402R和ERA-ASFV-MGF 3个检测方法分别在16、7和13 min内即可得出检测结果;特异性强,对阳性样品拷贝数的检测下限均为102 μL?1;与我国非洲猪瘟诊断技术标准中的方法对比,结果符合率为100%. [结论] 本研究建立的 ERA检测方法可以用于ASFV的快速检测,为流行病学调查和现场检测提供了一种快速有效的检测方法.
ISSN:1001-411X
DOI:10.7671/j.issn.1001-411X.202101031