低钙对SD大鼠原代成釉细胞生物学特性影响的体外实验研究

• Published in: 西安交通大学学报（医学版） Vol. 42; no. 2; pp. 257 - 266
• Main Authors: 王永刚, 阮建平, 周静, 田剑刚, 黄瑞哲, 高江红
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 山东省东营市人民医院口腔科,山东东营 257091%陕西省牙颌面疾病临床研究中心,西安交通大学口腔医院口腔预防保健科,陕西西安 710004 05.03.2021; 陕西省牙颌面疾病临床研究中心,西安交通大学口腔医院口腔预防保健科,陕西西安 710004
• Subjects: 钙; 分化; 增殖; 凋亡; 成釉细胞
• ISSN: 1671-8259
• DOI: 10.7652/jdyxb202102015

R781.9; 目的 探索低水平的钙对成釉细胞生物学特性的影响.方法 用标准DMEM培养基培养大鼠原代成釉细胞,培养5d后,RT-PCR及免疫组化对其进行鉴定,然后分别加入含Ca2+0、0.6、1.2mmoL/L及100mL/L胎牛血清的不同钙浓度DMEM培养基.48h后倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT观察细胞增殖活力,Annexin V-PI观察细胞凋亡情况,Real time-PCR检测细胞釉原蛋白及激肽释放酶-4(KLK4)的mRNA表达水平.结果 标准DMEM培养基培养5d后,细胞呈铺路样排列,RT-PCR显示细胞釉原蛋白、KLK4均有表达;免疫组化显示多数细胞釉原蛋白染色阳性.不同浓度钙干预48h后,1.2mmoL/L Ca2+组部分细胞较0mmoL/L和0.6mmoL/L Ca2+组胞核密度高、透光性差、高柱状细胞数目多.随着培养基中Ca2+浓度降低,MTT显示成釉细胞增殖活性增加(P<0.01);Annexin V-PI检测显示凋亡细胞百分率降低,1.2mmoL/L Ca2+组与0mmoL/L Ca2+组间差异具有统计学意义(P<0.05);Real time-PCR显示细胞釉原蛋白及KLK4 mRNA表达水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 钙缺乏可能抑制成釉细胞分化,进而影响釉质矿化成熟.