ANKRD49通过增加Snail/Slug/ZEB1表达促进NCI-H1299细胞上皮-间充质转化的研究

• Published in: 中国病理生理杂志 Vol. 40; no. 7; pp. 1190 - 1196
• Main Authors: 高睿, 刘超锋, 胡金瑞, 梁刚, 付荣, 王维, 王海龙, 庞敏
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 山西医科大学第一医院呼吸与危重症医学科,呼吸疾病防治与基础研究山西省重点实验室,山西 太原 030001%山西医科大学基础医学研究中心,肿瘤生物学研究所,山西 晋中 030600%山西医科大学第一医院病理科,山西 太原 030001 2024
• Subjects: ankyrin repeat domain 49; epithelial-mesenchymal transition; 上皮-间充质转化; lung adenocarcinoma; 锚蛋白重复结构域蛋白49; 肺腺癌
• ISSN: 1000-4718
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2024.07.005

R363.2%R730.23%R734.2; 目的:研究锚蛋白重复结构域蛋白49(ANKRD49)对人肺腺癌NCI-H1299细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及其机制.方法:构建ANKRD49过表达的NCI-H1299肺腺癌细胞株,显微镜下观察ANKRD49过表达下细胞形态变化;采用RT-qPCR和Western blot法检测EMT相关指标[上皮钙黏素(E-cadherin)、转化生长因子β1(TGF-β1)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]及EMT相关转录因子(Snail、Slug、Twist与ZEB1)的mRNA和蛋白表达水平;采用细胞免疫荧光观察E-cadherin和vimentin在细胞中的定位和表达水平;免疫组织化学法检测ANKRD49过表达的H1299细胞及对照细胞接种裸鼠肺组织E-cadherin、α-SMA、Snail、Slug及ZEB1的表达.结果:与对照组相比,过表达ANKRD49组细胞表现出间充质细胞样形态(梭形样且紧密连接减少);RT-qPCR和Western blot结果显示ANKRD49过表达组间充质标志物vimentin和α-SMA的mRNA和蛋白质水平显著高于对照组,上皮标志物E-cadherin的mRNA和蛋白质水平低于对照组;与对照组相比,ANKRD49过表达后E-cadherin免疫荧光强度减弱,而vimentin免疫荧光强度显著增加;与对照组相比,ANKRD49过表达后显著增加Snail、Slug与ZEB1的表达;与对照组相比,ANKRD49过表达的NCI-H1299细胞接种裸鼠肺组织中E-cadherin显著减少,α-SMA、Snail、Slug及ZEB1的表达显著增加.结论:ANKRD49通过增加Snail1、Slug与ZEB1的表达来抑制E-cadherin的表达,提高vimentin和α-SMA的表达进而促进NCI-H1299细胞EMT发生.