Swertiamarin通过抑制肠上皮细胞细胞凋亡改善TNBS诱导的实验性结肠炎

• Published in: 南方医科大学学报 Vol. 44; no. 8; pp. 1545 - 1552
• Main Authors: 刘硕, 李静, 吴兴旺
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 安徽医科大学第一临床医学院,安徽 合肥 230000%蚌埠医科大学第一附属医院检验科,安徽 蚌埠 233003 01.08.2024; 蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 233003%安徽医科大学第一附属医院放射科,安徽 合肥 230000
• Subjects: PI3K/AKT通路; 肠屏障; intestinal epithelial cell apoptosis; intestinal barrier; 克罗恩病; Crohn's disease; 肠上皮细胞凋亡; Swertiamarin; PI3K/AKT pathway
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2024.08.13

目的 本研究旨在探讨Swertiamarin(STM)通过拮抗肠上皮细胞凋亡改善CD样结肠炎的作用和机制.方法 体外建立TNF-α刺激的Caco-2细胞凋亡模型,分为3组:对照组(Con)、TNF-α刺激组(TNF-α)和STM干预组(STM),通过Tunel染色、免疫印迹、免疫荧光和上皮电阻检测等方法,评估STM对细胞凋亡和屏障功能的影响.体内建立TNBS诱导的CD样结肠炎小鼠模型,分为3组:WT、TNBS和STM组,利用小鼠体质量变化、疾病活动指数评分、炎症评分和黏膜组织中炎症因子含量分析STM对结肠炎的作用;通过通透性、细菌移位率和紧密连接蛋白表达与定位观察STM对肠屏障功能的影响;使用Tunel染色和免疫印迹检测凋亡相关蛋白水平评估STM对上皮细胞凋亡的作用.体内外研究验证PI3K/AKT通路在STM抗肠上皮细胞凋亡中的调控作用.结果 体外研究中TUNEL染色结果显示,STM显著得减少TUNEL着色的Caco-2细胞的比例(P<0.05);免疫印迹数据显示,STM组中cleavedcaspase3和Bax的表达低于TNF-α 组(P<0.05),而Bcl2的水平则增高(P<0.05);肠屏障完整性和功能检测显示,STM恢复了TEER值(P<0.05)、促进了紧密连接蛋白(ZO1和claudin 1)的定位正常化和表达水平的上调(P<0.05),以及抑制了促炎因子(IL-6和CCL3)的表达(P<0.05).体内研究显示STM能缓解结肠炎和肠屏障功能障碍,具体表现为体重下降、疾病活动指数(DAI)评分、炎症评分和促炎因子(IL-6和CCL3)释放以及肠屏障通透性、结肠TEER、细菌移位和紧密连接蛋白(ZO1和Claudin-1)定位与表达均得到了改善(P<0.05).机制上,STM在体和体外均抑制了p-PI3K和p-AKT的表达(P<0.05),且PI3K/AKT通路的激活剂(740YP)阻遏了STM抗TNF-α诱导的Caco-2凋亡作用(P<0.05).结论 STM至少部分是通过抑制PI3K/AKT通路的激活,拮抗肠上皮细胞细胞的凋亡,进而改善肠屏障功能障碍和实验性结肠炎.