热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元的损伤作用

R338.1%R339.52%R363.21; 目的 探究热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元损伤的影响.方法 热刺激BV2小胶质细胞后收集上清,通过不同的超速离心速度获取细胞外大囊泡和小囊泡.利用纳米粒度分析仪检测粒径,利用Western blot检测囊泡上TSG101、CD63和flotillin-1的表达.PKH67标记BV2来源的囊泡后与N2a细胞共孵育,检测神经元对小胶质细胞细胞外囊泡的摄取情况.分别将热刺激后BV2来源的大囊泡和小囊泡与N2a共孵育,通过CCK-8、细胞外乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、台盼蓝染色和TUNEL染色法评价热刺激后N2a...

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Published in陆军军医大学学报 Vol. 46; no. 18; pp. 2029 - 2035
Main Authors 李萍, 罗雪, 罗珍, 何根林, 王泽泽, 申婷婷, 刘晓倩, 谭雨龙, 杨学森
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 400038 重庆,陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系热带医学教研室 15.09.2024
Subjects
细胞外囊泡
热刺激
heat stress
neuronal damage
extracellular vesicles
神经元损伤
microglia
小胶质细胞
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ISSN2097-0927
DOI10.16016/j.2097-0927.202403095

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Summary:R338.1%R339.52%R363.21; 目的 探究热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元损伤的影响.方法 热刺激BV2小胶质细胞后收集上清,通过不同的超速离心速度获取细胞外大囊泡和小囊泡.利用纳米粒度分析仪检测粒径,利用Western blot检测囊泡上TSG101、CD63和flotillin-1的表达.PKH67标记BV2来源的囊泡后与N2a细胞共孵育,检测神经元对小胶质细胞细胞外囊泡的摄取情况.分别将热刺激后BV2来源的大囊泡和小囊泡与N2a共孵育,通过CCK-8、细胞外乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、台盼蓝染色和TUNEL染色法评价热刺激后N2a的损伤情况.结果 小囊泡粒径介于30～120 nm,高表达TSG101和CD63,大囊泡粒径介于90～1000 nm,高表达flotillin-1;BV2来源的细胞外囊泡可被N2a细胞摄取并参与热刺激对N2a细胞损伤的调节,其中CCK-8检测结果表明小胶质细胞来源的大小囊泡均能降低热刺激后N2a细胞的活力(P<0.05).LDH检测、台盼蓝染色及TUNEL检测结果表明大囊泡(P<0.05)和小囊泡(P<0.01)均能显著提高热刺激后N2a细胞LDH的释放水平、N2a细胞的蓝染水平及凋亡程度,且小囊泡处理组中N2a细胞的LDH释放水平、蓝染和凋亡水平高于大囊泡处理组.结论 热刺激后小胶质细胞通过细胞外囊泡加剧了神经元的损伤.
ISSN:2097-0927
DOI:10.16016/j.2097-0927.202403095