屋尘螨过敏原Der p 1在毕赤酵母中的重组表达与纯化

Q933; 基于巴斯德毕赤酵母表达系统探讨了屋尘螨过敏原Der p 1的重组表达与纯化.首先,采用毕赤酵母GS115表达密码子优化的全长编码基因PreProDer p 1,其产量可达100 mg/L,进一步共表达分子伴侣实现产量提高到 140 mg/L,并实现 3L反应器发酵产量提高到 1 g/L.其次,对上述重组蛋白发酵液分别使用阳离子交换层析及亲和层析进行了纯化工艺优化,目的蛋白得率达到60.7%.本研究为后续PreProDre p 1诊断试剂盆的开发提供了参考....

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Published in华东理工大学学报（自然科学版） Vol. 50; no. 4; pp. 543 - 549
Main Authors 于飞祥, 刘海峰, 任燕娜, 蔡孟浩
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237%华润昂徳生物药业有限公司,山东聊城 252201 01.08.2024
Subjects
尘螨过敏原
gene copy
protein purification
recombinant expression
蛋白纯化
dust mite allergen
Pichia pastoris
基因拷贝
毕赤酵母
重组表达
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Summary:Q933; 基于巴斯德毕赤酵母表达系统探讨了屋尘螨过敏原Der p 1的重组表达与纯化.首先,采用毕赤酵母GS115表达密码子优化的全长编码基因PreProDer p 1,其产量可达100 mg/L,进一步共表达分子伴侣实现产量提高到 140 mg/L,并实现 3L反应器发酵产量提高到 1 g/L.其次,对上述重组蛋白发酵液分别使用阳离子交换层析及亲和层析进行了纯化工艺优化,目的蛋白得率达到60.7%.本研究为后续PreProDre p 1诊断试剂盆的开发提供了参考.
ISSN:1006-3080
DOI:10.14135/j.cnki.1006-3080.20230605003