地锦叶斑病菌鉴定及LAMP快速检测体系的建立

S432.1; [目的]明确引起云南玉龙县地锦叶斑病的病原种类,并建立快速检测方法.[方法]采用组织分离法分离病原菌,并依据科赫氏法则确定地锦叶斑病病原,通过形态学特征及多基因联合构建系统发育树,明确病原菌的分类地位;以病原菌的Alt a1 基因序列为靶标设计特异性引物建立环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法.[结果]地锦叶斑病病原菌鉴定为链格孢菌Alternaria alternata.建立的LAMP反应体系可特异有效地检测出地锦叶斑病菌,该体系最佳反应温度为 65℃、最佳反应时间为 50 min、最低检测灵敏度为...

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Published in华南农业大学学报 Vol. 46; no. 1; pp. 89 - 96
Main Authors 黄成玉, 陈健鑫, 郑星月, 吴峰婧琳, 马焕成, 伍建榕
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 西南林业大学生物多样性保护学院/云南省高校森林灾害预警控制重点实验室,云南昆明 650224%西南林业大学林学院/国家林业和草原局西南地区生物多样性保育重点实验室,云南昆明 650224 2025
Subjects
Parthenocissus tricuspidata
Pathogen identification
LAMP体系
病原鉴定
链格孢菌
LAMP system
Alternaria alternata
地锦
叶斑病
Leaf spot
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ISSN1001-411X
DOI10.7671/j.issn.1001-411X.202401012

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Summary:S432.1; [目的]明确引起云南玉龙县地锦叶斑病的病原种类,并建立快速检测方法.[方法]采用组织分离法分离病原菌,并依据科赫氏法则确定地锦叶斑病病原,通过形态学特征及多基因联合构建系统发育树,明确病原菌的分类地位;以病原菌的Alt a1 基因序列为靶标设计特异性引物建立环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法.[结果]地锦叶斑病病原菌鉴定为链格孢菌Alternaria alternata.建立的LAMP反应体系可特异有效地检测出地锦叶斑病菌,该体系最佳反应温度为 65℃、最佳反应时间为 50 min、最低检测灵敏度为 1 pg/μL.使用该体系对人工接种病原菌不同时间的地锦叶片进行链格孢LAMP检测,检出时间为接种12h及以上.[结论]本研究可为地锦叶斑病的早期检测和科学防控提供理论依据.
ISSN:1001-411X
DOI:10.7671/j.issn.1001-411X.202401012