长链非编码RNA SNHG1对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

• Published in: 解放军医学杂志 Vol. 47; no. 2; pp. 118 - 127
• Main Authors: 万瑀, 马芳, 贺茜, 马胜超, 姜怡邓, 沈江涌
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 宁夏医科大学总医院烧伤整形外科,银川 750004%宁夏医科大学临床医学院,银川 750004 2022; 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004; 宁夏医科大学基础医学院,银川 750004%国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004; 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004%国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004; 宁夏医科大学临床医学院,银川 750004; 宁夏医科大学总医院烧伤整形外科,银川 750004
• Subjects: 增生性瘢痕;成纤维细胞;核仁小RNA宿主基因1;细胞增殖
• ISSN: 0577-7402
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2022.02.0118

R622; 目的 探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.方法 纳入2019－2021年在宁夏医科大学总医院烧伤整形外科接受手术治疗的22例增生性瘢痕患者,收集其增生性瘢痕组织与瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内),从中分离培养成纤维细胞.采用qRT-PCR从组织和细胞水平检测SNHG1 mRNA和miR-382-3p相对表达水平.将增生性瘢痕成纤维细胞随机分为对照组、SNHG1阴性对照组(转染慢病毒空载体)、模拟物对照组(转染对照模拟物)、SNHG1阴性对照+模拟物对照组(转染慢病毒空载体和对照模拟物)、SNHG1过表达组(转染过表达慢病毒)、miR-382-3p过表达组(转染miR-382-3p模拟物)、SNHG1过表达+模拟物对照组(转染过表达慢病毒和对照模拟物)与SNHG1过表达+miR-382-3p过表达组(转染过表达慢病毒和miR-382-3p模拟物),采用qRT-PCR检测各组SNHG1、PCNA、p27 mRNA和miR-382-3p的相对表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖能力;EdU染色法检测各组细胞增殖水平;Western blotting检测各组p27和PCNA蛋白表达水平.结果 与正常皮肤组织及其成纤维细胞相比,SNHG1 mRNA在增生性瘢痕组织(3.21±2.65 vs. 1.14±0.61, P<0.001)及其成纤维细胞中呈高表达(0.91±0.08 vs . 0.54±0.08, P<0.01),而miR-382-3p表达下调(组织:0.53±0.34 vs. 1.15±0.61,P<0.001;细胞:0.84±0.09 vs . 1.01±0.004, P<0.05).与SNHG1阴性对照组相比, SNHG1过表达组细胞增殖能力增强(0.23±0.03 vs . 0.16±0.01, P<0.001), EdU阳性细胞百分比明显增高(30.01%±5.70% vs . 7.13%±4.40%, P<0.001), PCNA mRNA和蛋白相对表达水平增高(mRNA:2.97±0.33 vs. 0.98±0.25, P<0.01;蛋白:2.20±0.09 vs. 0.88±0.20,P<0.05),p27 mRNA和蛋白相对表达水平降低(mRNA:0.30±0.03 vs. 1.42±0.15,P<0.00