甘蔗谷胱甘肽硫转移酶ScGSTF1与P3N-PIPO互作应答甘蔗花叶病毒侵染的研究

谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST,EC2.5.1.18)广泛分布于具有细胞结构的生物中.在植物中,GST参与调控生长发育、异生物质解毒及逆境应答.本课题组以甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)编码蛋白P3N-PIPO为诱饵,从甘蔗(Saccharum spp.hybrid)叶片cDNA酵母文库中筛选到 1 个GST基因,并从甘蔗原始栽培种Badila中克隆了该基因,其开放读码框(open reading frame,ORF)长度为 645 bp,编码 214 个氨基酸.序列比对及进化树分析表明,该基因编码蛋白属于G...

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Published in作物学报 Vol. 49; no. 10; pp. 2665 - 2676
Main Authors 杨宗桃, 焦文迪, 张海, 张克闽, 程光远, 罗廷绪, 曾康, 周营栓, 徐景升
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 福建农林大学农业农村部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室/国家甘蔗工程技术研究中心,福建福州 350002 12.10.2023
Subjects
甘蔗花叶病毒
蛋白互作
甘蔗
Sugarcane mosaic virus
protein interaction
glutathione S-transferase
谷胱甘肽硫转移酶
P3N-PIPO
sugarcane
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ISSN0496-3490
DOI10.3724/SP.J.1006.2023.34020

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Summary:谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST,EC2.5.1.18)广泛分布于具有细胞结构的生物中.在植物中,GST参与调控生长发育、异生物质解毒及逆境应答.本课题组以甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)编码蛋白P3N-PIPO为诱饵,从甘蔗(Saccharum spp.hybrid)叶片cDNA酵母文库中筛选到 1 个GST基因,并从甘蔗原始栽培种Badila中克隆了该基因,其开放读码框(open reading frame,ORF)长度为 645 bp,编码 214 个氨基酸.序列比对及进化树分析表明,该基因编码蛋白属于GST家族的Phi(F)类型(GSTF),因此命名为ScGSTF1.进一步的生物信息学分析表明,ScGSTF1 不存在跨膜区域,为稳定的亲水性脂溶蛋白;GST蛋白在单子叶和双子叶植物中及C3 和C4植物中存在明显的分化.酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complemen-tation,BiFC)试验表明,ScGSTF1 与SCMV-P3N-PIPO蛋白互作.亚细胞定位试验表明ScGSTF1 定位于内质网.实时荧光定量PCR分析表明,ScGSTF1在甘蔗各个组织中显著差异表达,在第3节间中的表达量最高,在心叶及根中的表达量最低;SCMV侵染显著性影响ScGSTF1基因的表达水平,侵染早期上调表达,随后下调,但仍保持显著高于对照的水平.
ISSN:0496-3490
DOI:10.3724/SP.J.1006.2023.34020