基于SSR分子标记的'粤秀3号'黄瓜杂交种子纯度及真实性鉴定

• Published in: 广东农业科学 Vol. 50; no. 9; pp. 49 - 58
• Main Authors: 金庆敏, 林毓娥, 王瑞, 钟玉娟, 吴廷全
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 广东省农业科学院设施农业研究所,广东 广州 510640 2023; 广东省农业科学院蔬菜研究所/广东省蔬菜新技术研究重点实验室,广东 广州 510640%广东省农业科学院蔬菜研究所/广东省蔬菜新技术研究重点实验室,广东 广州 510640%广东省农业科学院设施农业研究所,广东 广州 510640
• Subjects: field trait identification; 粤秀3号; purity identification; SSR molecular marker; 田间性状鉴定; Yuexiu No.3; authenticity identification; 黄瓜; 真实性鉴定; SSR分子标记; Cucumber; 种子纯度
• ISSN: 1004-874X
• DOI: 10.16768/j.issn.1004-874X.2023.09.005

S642.9; [目的]'粤秀 3 号'黄瓜具有生长势强、产量高、抗病及抗逆性强的特点,是华南地区推广面积较多的品种,本研究以期为其建立一套快速、准确、有效的种子纯度鉴定方法.[方法]利用200对SSR引物,根据杂种带为父母本互补带型的原则,对'粤秀 3 号'黄瓜及其亲本进行特异性SSR标记物的筛选.将种子纯度鉴定结果与田间生物学鉴定结果进行比较,鉴定所筛选SSR引物的准确性.选取'中农108''园丰6号''津绿 5 号''中农 8 号''津研四号'5 个黄瓜品种种子及其他 49 份黄瓜种质材料,与'粤秀 3 号'黄瓜品种同时检测,对所筛选的SSR引物特异性进行鉴定.[结果]从 200 对引物中筛选出符合父母带间成互补带要求的两对SSR引物(3B-10 和 2B-41).3B-10 引物经PCR扩增后产生 160 bp的母本特异条带(P1-A)及 190 bp的父本特异条带(P2-B),测序比对这两条特异性条带,发现P2-B在 49～79 bp处比P1-A多了 5 个 6 碱基的简单重复序列.2B-41 引物经PCR扩增后产生 218 bp的母本特异条带(P1-C)和 206 bp的父本特异条带(P2-D),经测序比对后发现,与P2-D相比,P1-C在120～131 bp处有12个碱基的缺失.表明两对SSR引物均可有效区分'粤秀 3 号'杂交种子及其父母本,可快速准确地鉴定'粤秀 3 号'黄瓜种子纯度.此外,两对SSR引物的种子纯度鉴定结果均与田间生物学鉴定结果一致.两对引物均可有效区分'粤秀 3 号'黄瓜种子与'中农 108''园丰6 号''津绿 5 号''中农 8 号''津研四号'5 个黄瓜品种种子及其他 49 份黄瓜种质资源.但 3B-10 在 49 份种质资源中多态性较高,故SSR标记 2B-41 更适用于'粤秀 3 号'的真实性鉴定.[结论]3B-10 和 2B-41 两对SSR引物可快速、准确、有效地对'粤秀 3 号'杂交种子纯度进行鉴定,鉴定操作较简单、成本较低,可替代传统杂交种子纯度鉴定的方法,其商业应用价值极高.