马铃薯淀粉酶StBAM9互作蛋白的鉴定及其互作机制分析

本实验室前期研究表明 β-淀粉酶 9(StBAM9)在马铃薯抗低温糖化中具有重要作用,但其并无 β-淀粉酶活性.为了研究 StBAM9 在马铃薯抗低温糖化中的功能机制,我们构建了低温贮藏后块茎 cDNA 酵母双杂交文库,并以StBAM9蛋白为诱饵,对其进行了互作蛋白的筛选和分析,结果显示分别以全长StBAM9和截去转运肽的StBAM9为诱饵筛选到的候选互作蛋白中有 12 个是共有的.酵母双杂交结果显示有 4 个蛋白(StDUF842、StTPR01660、StTPR22129 和StTPR45174)与StBAM9 互作.进一步通过谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白沉降技术验证表明,其中的 2个蛋白...

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Published in作物学报 Vol. 49; no. 10; pp. 2643 - 2653
Main Authors 杜鹃, 彭晓君, 侯娟, 刘腾飞, 刘增, 宋波涛
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 阿克陶县巴仁乡人民政府,新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州 845555%果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室/农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室/华中农业大学,湖北武汉430070 12.10.2023
河南农业大学园艺学院,河南郑州 450002%果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室/农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室/华中农业大学,湖北武汉430070
果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室/农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室/华中农业大学,湖北武汉430070%果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室/农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室/华中农业大学,湖北武汉430070
山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安 271018
Subjects
β-淀粉酶
蛋白互作
cold-induced sweetening(CIS)
starch degradation
低温糖化
protein interaction
淀粉降解
potato
β-amylase
马铃薯
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Summary:本实验室前期研究表明 β-淀粉酶 9(StBAM9)在马铃薯抗低温糖化中具有重要作用,但其并无 β-淀粉酶活性.为了研究 StBAM9 在马铃薯抗低温糖化中的功能机制,我们构建了低温贮藏后块茎 cDNA 酵母双杂交文库,并以StBAM9蛋白为诱饵,对其进行了互作蛋白的筛选和分析,结果显示分别以全长StBAM9和截去转运肽的StBAM9为诱饵筛选到的候选互作蛋白中有 12 个是共有的.酵母双杂交结果显示有 4 个蛋白(StDUF842、StTPR01660、StTPR22129 和StTPR45174)与StBAM9 互作.进一步通过谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白沉降技术验证表明,其中的 2个蛋白StTPR01660 和StTPR4517 与StBAM9 互作.双分子荧光互补结果显示只有StTPR01660 与StBAM9 互作于淀粉粒上,而StTPR01660 自身定位于细胞质.因此,我们推测StBAM9 可能通过从细胞质中招募StTPR01660 到淀粉粒上发挥淀粉降解的功能.
ISSN:0496-3490
DOI:10.3724/SP.J.1006.2023.34009