梓醇干预PKM2/LDHA表达调控Th17细胞分化的机制研究

• Published in: 中国药房 Vol. 35; no. 1; pp. 15 - 20
• Main Authors: 葛玉, 陈雪, 王福荣, 包宇杰, 丁鹏, 周玲玲
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 南京中医药大学药学院,南京 210023 2024
• Subjects: catalpol; 糖酵解; lactate dehydrogenase A; 丙酮酸激酶M2; helper T cell 17; glycolysis; pyruvate kinase M2; 梓醇; 乳酸脱氢酶A; 辅助性T细胞17
• ISSN: 1001-0408
• DOI: 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.01.03

R965%R285; 目的 研究梓醇通过干预丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)表达进而影响辅助性T细胞17(Th17)分化的机制.方法 从C57BL/6小鼠脾脏中分选出naive CD4+ T细胞,通过加入定向分化刺激剂诱导72 h使naive CD4+ T细胞向Th17细胞分化.在诱导分化的同时,分别用0(定向对照)、20、40、80 μg/mL梓醇对细胞进行处理.采用流式细胞术检测细胞中Th17细胞分化比例,采用比色法检测细胞培养上清液中丙酮酸、乳酸水平,采用实时荧光定量-逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测细胞中视黄酸相关孤儿受体γt(RORγt)、PKM2、LDHA mRNA表达情况,采用Western blot法检测细胞中PKM2、LDHA、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达情况.结果 与定向对照组比较,经20、40、80 μg/mL梓醇作用72 h后,细胞中Th17细胞分化比例分别降低了6.74%、8.41%、9.24%;细胞培养上清液中丙酮酸、乳酸水平,细胞中PKM2、LDHA、RORγt mRNA表达水平以及细胞中PKM2、LDHA蛋白表达水平和STAT3磷酸化水平均显著降低(P＜0.05).结论 梓醇可通过下调PKM2、LDHA表达来降低糖酵解水平,进而抑制Th17细胞分化.