基于理性设计提高假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性

Q814; 对假交替单胞菌JMUZ2的κ-卡拉胶酶进行理性设计,以获得热稳定性提高的突变酶.用PoPMuSiC在线分析工具对假交替单胞菌κ-卡拉胶酶进行分析,筛选了 10个单点突变体.利用定点突变获得突变酶基因,并对突变酶进行诱导表达、纯化及性质鉴定,筛选出酶比活力不降低且热稳定性提高的突变体K155A.热稳定性分析表明,在50、55℃和60℃分别处理40 min,突变酶残余酶活力分别是野生型酶的1.8、2.7倍和4.5倍.酶的结构及分子动力学模拟分析表明,酶分子疏水相互作用和结构刚性的增强是K155A突变体热稳定性提高的可能原因.通过理性设计获得假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性提高的突变体K...

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Published in食品科学 Vol. 43; no. 22; pp. 159 - 165
Main Authors 龙柳妃, 苏羽, 陈艳红, 姜泽东, 倪辉, 李清彪, 朱艳冰
Format Magazine Article
LanguageChinese
Published 集美大学海洋食品与生物工程学院,福建厦门 361021%集美大学海洋食品与生物工程学院,福建厦门 361021 25.11.2022
福建省食品微生物与酶工程重点实验室,厦门市食品生物工程技术研究中心,福建厦门 361021
Subjects
κ-卡拉胶酶
热稳定性
理性设计
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ISSN1002-6630
DOI10.7506/spkx1002-6630-20211129-358

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Summary:Q814; 对假交替单胞菌JMUZ2的κ-卡拉胶酶进行理性设计,以获得热稳定性提高的突变酶.用PoPMuSiC在线分析工具对假交替单胞菌κ-卡拉胶酶进行分析,筛选了 10个单点突变体.利用定点突变获得突变酶基因,并对突变酶进行诱导表达、纯化及性质鉴定,筛选出酶比活力不降低且热稳定性提高的突变体K155A.热稳定性分析表明,在50、55℃和60℃分别处理40 min,突变酶残余酶活力分别是野生型酶的1.8、2.7倍和4.5倍.酶的结构及分子动力学模拟分析表明,酶分子疏水相互作用和结构刚性的增强是K155A突变体热稳定性提高的可能原因.通过理性设计获得假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性提高的突变体K155A,对改善酶的性质、扩大κ-卡拉胶酶的应用范围以及κ-卡拉胶酶结构与功能关系研究具有重要意义.
ISSN:1002-6630
DOI:10.7506/spkx1002-6630-20211129-358