基于pH响应涂层柱的毛细管电泳法在线富集和分离糖蛋白

• Published in: Sepu Vol. 42; no. 9; pp. 903 - 908
• Main Authors: 张剑, 徐彩凤, 马彩莲, 贺茂芳, 张博, 刘春叶
• Format: Journal Article
• Language: Chinese; English
• Published: No. 457, Zhongshan Road, Shahekou District, Dalian City, Liaoning Province 西安医学院药学院,陕西 西安 710021 08.09.2024; Editorial board of Chinese Journal of Chromatography
• Subjects: a; 苯硼酸; 毛细管电泳; 在线富集; 离子吸附; on-line enrichment; capillary electrophoresis(CE); glycoprotein; phenylboronic acid; 糖蛋白; ion adsorption
• ISSN: 1000-8713; 1872-2059
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2023.09021

O658; 本研究通过静电自组装法制备了一种 3-氨基苯硼酸(APBA)修饰的纳米金(AuNPs@APBA)涂层毛细管柱,该毛细管柱兼具抗非特异性吸附性和富集选择性,将其作为分离通道,建立了基于pH响应涂层柱的糖蛋白在线富集与分离方法.首先,采用柠檬酸钠还原法制备金纳米颗粒(AuNPs),再将APBA通过静电自组装修饰到AuNPs表面,制得AuNPs@APBA纳米材料;利用离子吸附作用将AuNPs@APBA吸附到毛细管内壁上,制得AuNPs@APBA涂层毛细管柱.在pH为 8 的条件下,糖蛋白能够与毛细管内表面的硼酸基团结合形成硼酸酯,从而被吸附;当pH为 3 时,硼酸酯发生解离并释放出糖蛋白,基于上述原理,该方法能够实现糖蛋白的选择性在线富集与分离.实验结果表明,与使用普通电泳法的裸柱相比,经AuNPs@APBA涂层毛细管柱富集后,卵清蛋白(OVA)的峰面积增大了 26.46 倍,而牛血清白蛋白(BSA)的峰面积仅增大了 8.47 倍;并且,将鸡蛋清样品稀释 1×106 倍后,仍可利用该方法对糖蛋白进行检测.该方法样品用量少,操作简单,分离效率高,可用于实际样品中痕量糖蛋白的在线富集与分离.