清解化攻方调控NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎小鼠模型胰腺组织的保护作用

• Published in: Linchuang gandanbing zazhi Vol. 40; no. 2; pp. 343 - 350
• Main Authors: 冯敏超, 秦百君, 罗芳, 李凯, 王宁, 陈国忠, 唐曦平
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: Changchun Journal of Clinical Hepatology 01.02.2024; 广西中医药大学第一临床医学院, 南宁 530000%广西中医药大学第一附属医院消化内科, 南宁 530023%广西医科大学附属肿瘤医院内镜中心, 南宁 530021
• Subjects: Cytokines; Drug dosages; Pancreatitis; Protein expression; Proteins; Tumor necrosis factor-TNF; 胰腺炎; NF-κB; Toll-Like Receptor 4; NF-kappa B; 清解化攻方; NLR Proteins; NLR蛋白质类; Pancreatitis; Qingjie Huagong Decoction; Mice,Inbred C57BL; 小鼠,近交C57BL; Toll样受体4
• ISSN: 1001-5256; 2097-3497
• DOI: 10.12449/JCH240219

目的 观察清解化攻方对重症急性胰腺炎 (SAP) 小鼠模型的治疗作用，探索清解化攻方抗炎症反应的作用机制。 方法 将36只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白组，模型组，清解化攻方低、中、高剂量组，西药组 (乌司他丁) ，每组6只，除空白组小鼠，余各组小鼠采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型，清解化攻方低、中、高剂量组在造模后分别予以清解化攻方1、2、4 g/kg灌胃，西药组在造模后予以腹腔注射乌司他丁 (5×104 U/kg) ，共干预7 d。采用苏木素-伊红染色观察胰腺组织病理改变；酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 检测小鼠α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α水平；RT-qPCR检测胰腺组织NOD样受体蛋白3 (NLRP3) 、Toll样受体4 (TLR4) 、核因子-κB (NF-κB) mRNA表达水平；免疫组化检测胰腺组织NLRP3、TLR4、NF-κB的阳性表达率；Western Blot技术检测NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白的表达水平。计量资料多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。 结果 与空白组相比，模型组小鼠胰腺组织结构弥漫性破坏、胰腺小叶间隔局灶性扩张、腺泡萎缩和大量炎症细胞浸润，α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显升高 (P值均<0.05) ，NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显上升 (P值均<0.05) ，NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达均明显上调 (P值均<0.05) 。与模型组相比，清解化攻方各剂量组和西药组可见小鼠胰腺组织结构稍紧密、完整，胰腺腺泡细胞排列有序，伴少量炎症细胞浸润和胰腺小叶出血灶，α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显下降 (P值均<0.05) ，NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显降低 (P值均<0.05) ，NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达水平均明显减弱 (P值均<0.05) 。 结论 清解化攻方可能通过抑制NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的激活，减少炎症介质的释放，防止炎症级联反应增强，进而对SAP小鼠胰腺组织发挥保护作用。