Vitamin E , Selenium , Zinc sulfate 가 다형핵백혈구의 Superoxide 유리 및 배양된 소의 망막색소상피세포에 미치는 영향

• Published in: Daihan angwa haghoi jabji Vol. 41; no. 1; pp. 81 - 89
• Main Authors: 서정봉, Jeong Bong Seo, 유진성, Jin Seong Yoo
• Format: Journal Article
• Language: Korean
• Published: 대한안과학회 2000
• Subjects: Antioxidant; Bovine RPE; Mineral; PMNs; Superoxide
• ISSN: 0378-6471

항산화제 또는 항산화효소 조인자인 vitamin E, selenium, zinc sulfate가 사람의 다형핵백혈구로부터의 superoxide 유리에 미치는 영향 및 소의 망막색소상피세포배양에 있어 항산화효과에 의한 망막색소상피세포 생존률의 변화를 알아보기 위해 본 연구를 시작하였다. 먼저 사람의 말초혈액에서 다형핵백혈구를 분리한 다음 phorbol myristate acetate(PMA)로 자극시켜 superoxide를 발생시키고, 항산화효과가 있을 것으로 생각되는 vitamin E, selenium, zinc sulfate를 농도별로 첨가한 후 발생한 superoxide의 양을 cytochrome c의 환원도를 microplate reader로 550㎚에서 측정함으로써 알아보았다. 그 후 배양된 소의 망막색소상피세포에 활성화된 다형핵백혈구를 넣고 항산화제 또는 항산화효소 조인자를 농도별로 첨가하여 같이 배양한 다음 세포의 생존률을 MTT assay를 이용하여 측정하였다. 그 결과 vitamin E와 zinc sulfate 에서는 1 0㎛ 이상의 농도에서 superoxide 유리를 억제하는 것으로 나타났고 selenium의 경우 억제효과가 없었다. 망막색소상피세포의 배양실험에서는 vitamin E와 zinc sulfate의 경우 1,10,20㎛의 농도에서 모두 세포의 생존률을 유의하게 증가시켰으며 selenium은 유의한 변화를 보이지 않았다. 위의 실험으로 소의 망막색소상피세포 배양에 있어 사람의 다형핵백혈구에서 유리된 super-oxide가 유리기 손상을 초래하여 망막색소상피세포수가 감소하며 배양시 vitamin E, zinc sulfate를 망막색소상피세포의 배양에 추가 시는 superoxide의 손상의 정도 가 줄어들어 세포의 생존수가 증가함을 알 수 있었다. 이상에서의 연구결과로 생체 내에서 superoxide의 발생이 병인의 하나라고 생각되어지는 포도막염이나 유리체망막염, Behcet씨 병 등의 안 질환에서 보조적인 치료법으로 항산화 비타민이나 zinc 등을 사용하여 질병의 예방 및 진행 억제에 효과를 가져올 수 있을 것으로 사료된다(한안지 41:81~89,2000). To evaluate antioxidative effect of vitamin E, selenium and zinc sulfate on release of oxygen free radicals from polymorphonuclear leukocytes(PMNs), I measured the amount of superoxide release from human PMNs stimulated by phorbol myristate acetate(PMA)with addition of some antioxidant and antioxidative micronutrients using superoxide-dependent cytochrome c reduction. And to determine a protective effect of them on cultured bovine retinal pigment epithelial cells (RPE)from oxygen radicals, I measured a viability of bovine RPE using MTT assay after incubation with human PMNs and PMA. Vitamin E, selenuim and zinc sulfate are utilized at different concentrations of 1,10 and 20㎛. Vitamin E and zinc sulfate inhibited superoxide production from PMNs stimulated by PMA from 10㎛ concentration gnificantly. But in case of selenium, significant antioxidative effect was not found at each concentration. The antioxidative effect on cultured bovine RPE was evaluated using MTT assay. Among antioxidant and antioxidative micronutrients tested, vitamin E and zinc sulfate inhibited free radical damage to bovine RPE, they increased cell survival rate on culture at concentration of 1,10 and 20㎛. In contrast, selenium did not increase cell survival rate significantly. With these results, it was found that vitamin E and zinc sulfate had antioxidative effect against superoxide release from PMNs and also protective effect of bovine RPE from free radical damages. Recent studies supported that peroxide may play an important role in causing tissue damage in human and experimental models of ocular inflammation and possibly in Behcet`s disease. It was suggested that antioxidant vitamins and minerals like vitamin E or zinc sulfate might be useful for management and/or prevention of these conditions(J Korean Ophthalmol Soc 41:81~89,2000).