MBTH-DCP法を用いた糖蛋白質の分析(1)

［目的］従来, 支持体電気泳動法により分離した糖蛋白質の検出にはシッフ試薬を用いた方法1)やCon-A, PODで処理後3, 3'-ジアミノベンチジン(DAB)を用いて検出する方法2)などが用いられてきた. われわれはイムノブロット法における標識PODの高感度な検出法としてメチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン(MBTH)クロロフェノール(DCP)を用いる方法を確立し報告3)した. 今回, 本検出法を生体成分の分析に応用する目的でPOD活性の検出に基づく糖蛋白質の分析を試みたので報告する. ［材料および方法］試料には担癌(甲状腺癌, 食道癌, 胎児性癌, 肝癌, 他〕ヌードラット血清およ...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in生物物理化学 Vol. 36; no. 5; p. 292
Main Authors 高浜康弘, 西口慶一, 吉田光孝, 今井利夫, 谷本義文, 櫻林郁之介
Format Journal Article
LanguageJapanese
Published 日本電気泳動学会 01.10.1992
Online AccessGet full text
ISSN0031-9082

Cover

Abstract ［目的］従来, 支持体電気泳動法により分離した糖蛋白質の検出にはシッフ試薬を用いた方法1)やCon-A, PODで処理後3, 3'-ジアミノベンチジン(DAB)を用いて検出する方法2)などが用いられてきた. われわれはイムノブロット法における標識PODの高感度な検出法としてメチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン(MBTH)クロロフェノール(DCP)を用いる方法を確立し報告3)した. 今回, 本検出法を生体成分の分析に応用する目的でPOD活性の検出に基づく糖蛋白質の分析を試みたので報告する. ［材料および方法］試料には担癌(甲状腺癌, 食道癌, 胎児性癌, 肝癌, 他〕ヌードラット血清およびヒト癌患者血清を用いた. 糖蛋白質の分離はPAGスラブ電気泳動法および2次元電気泳動法〔PAGIEF-グラジエンドPAG(4-17％)〕を用いた. 検出反応における前処理法は, Ochiaiらの方法2)に準じ, 泳動後のゲルをConA(25mg/ml)で処理し洗浄後, PODと2時間反応させた. 過剰のPODは洗浄後, 本法およびDAB法(33mg DAB004％H2O2-15mM リン酸緩衝液(pH6. 7)により検出した. また, 糖蛋白質のうちPOD様活性を有する成分の分析はo-ジアニシジン法4)に準じて行なった.
AbstractList ［目的］従来, 支持体電気泳動法により分離した糖蛋白質の検出にはシッフ試薬を用いた方法1)やCon-A, PODで処理後3, 3'-ジアミノベンチジン(DAB)を用いて検出する方法2)などが用いられてきた. われわれはイムノブロット法における標識PODの高感度な検出法としてメチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン(MBTH)クロロフェノール(DCP)を用いる方法を確立し報告3)した. 今回, 本検出法を生体成分の分析に応用する目的でPOD活性の検出に基づく糖蛋白質の分析を試みたので報告する. ［材料および方法］試料には担癌(甲状腺癌, 食道癌, 胎児性癌, 肝癌, 他〕ヌードラット血清およびヒト癌患者血清を用いた. 糖蛋白質の分離はPAGスラブ電気泳動法および2次元電気泳動法〔PAGIEF-グラジエンドPAG(4-17％)〕を用いた. 検出反応における前処理法は, Ochiaiらの方法2)に準じ, 泳動後のゲルをConA(25mg/ml)で処理し洗浄後, PODと2時間反応させた. 過剰のPODは洗浄後, 本法およびDAB法(33mg DAB004％H2O2-15mM リン酸緩衝液(pH6. 7)により検出した. また, 糖蛋白質のうちPOD様活性を有する成分の分析はo-ジアニシジン法4)に準じて行なった.
Author 西口慶一
櫻林郁之介
谷本義文
高浜康弘
吉田光孝
今井利夫
Author_xml – sequence: 1
  fullname: 高浜康弘
– sequence: 2
  fullname: 西口慶一
– sequence: 3
  fullname: 吉田光孝
– sequence: 4
  fullname: 今井利夫
– sequence: 5
  fullname: 谷本義文
– sequence: 6
  fullname: 櫻林郁之介
BookMark eNotj7tKxFAYhE-xguu676FF8D_385caXVdY0SL9IZcTyBITMfoAERHBRkQFEbQVC5vUPk1ws49hRJsZpvlmZo0MirJwAzIE4NRDMGyVjKsqiwAEADWgh2TrcCeYerv-8aJ5bC_vu4f3tr5q67eueVq-3HbPX8vmo60_v2-uF693G3RznaykYV658b-PSDDZC_ypNzvaP_C3Z97caPSE1hKTkIooxggRJEt4RFNUknEujZQmdcoZGkaaOWeEooxKTrEfplIeaz4ikz_siUuyOMzLIs8KZ-flxVnR19r4VLrcxeeWIjLb_1MgLQhhgf3mXriSyJD_AK5sUyI
ContentType Journal Article
CorporateAuthor 東邦大・理・生理化学
自治医大・大宮医療センター
実中研
CorporateAuthor_xml – name: 実中研
– name: 自治医大・大宮医療センター
– name: 東邦大・理・生理化学
DatabaseTitleList
DeliveryMethod fulltext_linktorsrc
Discipline Anatomy & Physiology
EndPage 292
ExternalDocumentID cp5elect_1992_003605_044_0292_0292365929
GroupedDBID 123
2WC
ACPRK
ALMA_UNASSIGNED_HOLDINGS
CS3
HH5
JSP
MOJWN
OK1
RJT
ID FETCH-LOGICAL-j879-47759da14bc9b99052d3b1f96523358558fe6e81ab72ee84612153190046f3c73
ISSN 0031-9082
IngestDate Wed Apr 09 06:17:40 EDT 2025
IsPeerReviewed false
IsScholarly false
Issue 5
Language Japanese
LinkModel OpenURL
MergedId FETCHMERGED-LOGICAL-j879-47759da14bc9b99052d3b1f96523358558fe6e81ab72ee84612153190046f3c73
PageCount 1
ParticipantIDs medicalonline_journals_cp5elect_1992_003605_044_0292_0292365929
PublicationCentury 1900
PublicationDate 1992-10-01
PublicationDateYYYYMMDD 1992-10-01
PublicationDate_xml – month: 10
  year: 1992
  text: 1992-10-01
  day: 01
PublicationDecade 1990
PublicationTitle 生物物理化学
PublicationYear 1992
Publisher 日本電気泳動学会
Publisher_xml – name: 日本電気泳動学会
SSID ssib004001807
ssib002670225
ssib005879800
ssj0036824
ssib000872135
ssib058494308
ssib005901883
Score 1.2708619
Snippet ［目的］従来, 支持体電気泳動法により分離した糖蛋白質の検出にはシッフ試薬を用いた方法1)やCon-A, PODで処理後3, 3'-ジアミノベンチジン(DAB)を用いて検出する方法2)などが用いられてきた....
SourceID medicalonline
SourceType Publisher
StartPage 292
Title MBTH-DCP法を用いた糖蛋白質の分析(1)
URI http://mol.medicalonline.jp/en/journal/download?GoodsID=cp5elect/1992/003605/044&name=0292-0292j
Volume 36
hasFullText 1
inHoldings 1
isFullTextHit
isPrint
link http://utb.summon.serialssolutions.com/2.0.0/link/0/eLvHCXMwpR1NixMxNOzuSRFRV_GbHnyih9GZSTKTnCTTTinCiocKeysz6fSwsN1Fuwe9VUQELyIqiKBX8eClZ39Ncbs_w_cy03YqHlaFIWReXl7y3ptMXr5eGLshrJR5JJTnSys9USju5QOdeWGorQyU7VtJp5G3HkSdR-L-ttxeW4farqWDUX7HPvvjuZJ_0SrCUK90SvYvNLsgigCMo34xRA1jeCwdbyXdjtdqPoQ0goSDlpByUCHoENIYtACjHCQAJaqIblMSIUeQKtAJqMQha0haBMEkYypkk0IqQSlQERWhU9A-OXaaTx9URm1VWElaaTB6JYJ5KD8SarpSJZgWmMWMIKSImIBWjgsJukkoiYEkdhHMpJa4CgzC2o5cGwynTAohSFdAgjX1l7jSFa2r6iW-yyQdxNVBt5a4mI6iMC5inCQd46bERUkmy_kRt5d2vtOu_KKdeGKqG0WaYJrEFkoXqRJbPqWWWsKHaCdVIU4Wrlhk1NQ7EU67WtRKJ1J6cakai6z3COVVf5VxsXhbcfFt96W79KhH9SdvrTjG7PlC9PyQ3jHgtPqt19k6D9zu1c6Kj8EwqNu8Uez_9pMOVG2ML1WsVc0nIx0-VksbEw1S8si_WIrjkQpLV-YV1yfZqd1yDbH05VIzx7pn2OlqHNUwZaM4y9Z2snNs0wyz0d7u08bNhtvZ7JaMNtndeTs5nLyfPn87e_d1On4xHX-ZTT4cfXo9-_jjaPJtOv7-89XLw89vbgW3z7NuO-02O151UYi3g8x4Io6l7meByK3O0bqSYZ_nwUBHMuQch8NSDYqoUEGWx2FRoMFNHlWw66G5oQG3Mb_ANoZ7w-Iia0i_QJs5sqKf4dBZFpmwwgbS6n4_0znXl9i9FeZ71d_gSe-4Orz83xSusBPL7_wq2xg9PiiuoWU8yq-7L-MXUzaCKQ
linkProvider ABC ChemistRy
openUrl ctx_ver=Z39.88-2004&ctx_enc=info%3Aofi%2Fenc%3AUTF-8&rfr_id=info%3Asid%2Fsummon.serialssolutions.com&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.atitle=MBTH-DCP%E6%B3%95%E3%82%92%E7%94%A8%E3%81%84%E3%81%9F%E7%B3%96%E8%9B%8B%E7%99%BD%E8%B3%AA%E3%81%AE%E5%88%86%E6%9E%90%281%29&rft.jtitle=%E7%94%9F%E7%89%A9%E7%89%A9%E7%90%86%E5%8C%96%E5%AD%A6&rft.au=%E9%AB%98%E6%B5%9C%E5%BA%B7%E5%BC%98&rft.au=%E8%A5%BF%E5%8F%A3%E6%85%B6%E4%B8%80&rft.au=%E5%90%89%E7%94%B0%E5%85%89%E5%AD%9D&rft.au=%E4%BB%8A%E4%BA%95%E5%88%A9%E5%A4%AB&rft.date=1992-10-01&rft.pub=%E6%97%A5%E6%9C%AC%E9%9B%BB%E6%B0%97%E6%B3%B3%E5%8B%95%E5%AD%A6%E4%BC%9A&rft.issn=0031-9082&rft.volume=36&rft.issue=5&rft.spage=292&rft.epage=292&rft.externalDocID=cp5elect_1992_003605_044_0292_0292365929
thumbnail_l http://covers-cdn.summon.serialssolutions.com/index.aspx?isbn=/lc.gif&issn=0031-9082&client=summon
thumbnail_m http://covers-cdn.summon.serialssolutions.com/index.aspx?isbn=/mc.gif&issn=0031-9082&client=summon
thumbnail_s http://covers-cdn.summon.serialssolutions.com/index.aspx?isbn=/sc.gif&issn=0031-9082&client=summon