血小板第4因子のエンザイムイムノアッセイによる測定法の開発と血小板特異性
緒言 血小板第4因子(以下, PF4)はβ-トロンボグロプリン(以下, β-TG)などと共に血小板の凝集時に, 血漿中に放出される熱に安定な蛋白である1)~3). その際には, プロテオグリカン・キャリアーと複合体を形成して放出されると報告されている4). PF4は4個の等しいサブユニットからなる蛋白でその分子量は約3万である4)5). またPF4の70個からなるアミノ酸の一次構造は, β-TGと類似していることが知られている6)~10). 最近, 骨髄の巨核球での生合成が証明されている11). PF4はヘパリンと強く結合することが知られており12)13), この性質を利用したヘパリン-セファ...
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Published in | 日本輸血学会雑誌 Vol. 30; no. 1; pp. 9 - 13 |
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Main Authors | , , |
Format | Journal Article |
Language | Japanese |
Published |
一般社団法人 日本輸血・細胞治療学会
1984
日本輸血学会 |
Online Access | Get full text |
ISSN | 0546-1448 1883-8383 |
DOI | 10.3925/jjtc1958.30.9 |
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Abstract | 緒言 血小板第4因子(以下, PF4)はβ-トロンボグロプリン(以下, β-TG)などと共に血小板の凝集時に, 血漿中に放出される熱に安定な蛋白である1)~3). その際には, プロテオグリカン・キャリアーと複合体を形成して放出されると報告されている4). PF4は4個の等しいサブユニットからなる蛋白でその分子量は約3万である4)5). またPF4の70個からなるアミノ酸の一次構造は, β-TGと類似していることが知られている6)~10). 最近, 骨髄の巨核球での生合成が証明されている11). PF4はヘパリンと強く結合することが知られており12)13), この性質を利用したヘパリン-セファロース・アフィニティクロマトグラフィーの発達により, 抗原蛋白としての精製が容易になった. このため現在までに数多くのラジオイムノアッセイが報告されており5)14)~18), in vivoにおける血小板の凝集や放出反応のマーカー蛋白として利用されている. PF4のラジオイムノアッセイはわが国でもキットとして発売されているが, ^^125 Iの半減期が短いことから長く貯蔵出来ないなどの欠点がある. 我々は高感度で特異的なPF4のサンドイッチ式エンザイムイムノアッセイの開発を試みた. この蛋白の血小板局在性, そして濃縮血小板血漿の血漿中の含量について検討した. |
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AbstractList | 緒言 血小板第4因子(以下, PF4)はβ-トロンボグロプリン(以下, β-TG)などと共に血小板の凝集時に, 血漿中に放出される熱に安定な蛋白である1)~3). その際には, プロテオグリカン・キャリアーと複合体を形成して放出されると報告されている4). PF4は4個の等しいサブユニットからなる蛋白でその分子量は約3万である4)5). またPF4の70個からなるアミノ酸の一次構造は, β-TGと類似していることが知られている6)~10). 最近, 骨髄の巨核球での生合成が証明されている11). PF4はヘパリンと強く結合することが知られており12)13), この性質を利用したヘパリン-セファロース・アフィニティクロマトグラフィーの発達により, 抗原蛋白としての精製が容易になった. このため現在までに数多くのラジオイムノアッセイが報告されており5)14)~18), in vivoにおける血小板の凝集や放出反応のマーカー蛋白として利用されている. PF4のラジオイムノアッセイはわが国でもキットとして発売されているが, ^^125 Iの半減期が短いことから長く貯蔵出来ないなどの欠点がある. 我々は高感度で特異的なPF4のサンドイッチ式エンザイムイムノアッセイの開発を試みた. この蛋白の血小板局在性, そして濃縮血小板血漿の血漿中の含量について検討した. |
Author | 加藤, 兼房 清水, 哲夫 福田, 常男 |
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Publisher | 一般社団法人 日本輸血・細胞治療学会 日本輸血学会 |
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References | 9) Deuel, T. F., Keim, P. S., Farmer, M. and Heinrikson, R. L.: Amino acid sequence of human platelet factor 4. Pro. Nat. Acad. Sci. U. S. A., 74: 2256-2258, 1977. 18) Chesterman, C. N., McGready, J. R., Doyle, D. J. and Morgan, F. J.: Plasma levels of platelet factor 4 measured by radioimmunoassay. Brit. J. Haematol., 40: 489-500, 1978. 5) Rucinski, B., Niewiarowski, S., James, P., Walz, D. A. and Budzynski, A. Z.: Antiheparin proteins secreted by human platelets. Purification, characterization, and radioimmunoassay. Blood, 53: 47-62, 1979. 17) Kaplan, K. L., Nossel, H. L., Drillings, M. and Lesznik, G.: Radioimmunoassay of platelet factor 4 and β-thromboglobulin: Development and application to studies of platelet release in relation of fibrionopeptide A generation. Brit J. Haematol., 39: 129-146, 1978. 14) Levine, S. P. and Krentz, L. S.: Development of a radioimmunoassay for human platelet factor 4. Thromb. Res., 11: 673-686, 1977. 15) Files, J. C., Malpass, T. W., Yee, E. K., Ritchie, J. L. and Harker, L. A.: Studies of human platelet α-granule release in vivo. Blood, 58: 607-618, 1981. 6) Levine, S. P. and Wohl, H.: Human platelet factor 4: Purification and characterization by affinity chromatography. Purification of human platelet factor 4. J. Biol. Chem., 251: 324-328, 1976. 13) Nath, N., Lowery, C. T. and Niewiarowski, S.: Antigenic and antiheparin properties of human platelet factor 4 (PF4). Blood, 45: 537-550, 1975. 3) Niewiaroski, S. and Thomas, D. P.: Platelet factor 4 and adenosine diphosphate release during human platelet aggregation. Nature, 222: 1269-1270, 1969. 4) More, S., Pepper, D. S. and Cash, J. D.: Platelet antiheparin activity. The isolation and characterization of platelet factor 4 released from thrombin-aggregated washed human platelets and its dissociation into subunits and the isolation of membrane-bound antiheparin activity. Biochim. Biophys. Acta, 379: 370-384, 1975. 23) Snyder, E. L., Hezzey, A., Katz, A. J. and Bock, J.: Occcurrence of the release reaction during preparation and storage of platelet concentrates. Vox Sang., 41: 172-177, 1981. 12) Kaplan, K. L., Broekman, M. J., Cherroff, A., Lesznik, G. R. and Drillings, M.: Platelet α-granule proteins: Studies on release and sub-cellular localization. Blood, 53: 604-618, 1979. 2) Kaplan, K. L. and Owen, J.: Plasma levels of β-thromboglobulin and platelet factor 4 as indices of platelet activation in vivo. Blood, 57: 199-202, 1981. 11) Ryo, R., Nakeff A., Huang, S. S., Ginsberg, M. and Deuel, T. F.: New synthesis of a platelet-specific protein: Platelet factor 4 synthesis in a megakaryocyte-enriched rabbit bone marrow culture system. J. Cell Biol., 96: 515-520, 1983. 16) Bolton, A. E., Ludlam, C. A., Pepper, D. S., Moore, S. and Cash, J. D.: A radioimmunoassay for platelet factor 4. Thromb. Res., 8: 51-58, 1976. 22) Kato, K., Suzuki, F. and Umeda, Y.: Highly sensitive immunoassay for three forms of rat brain enolase. J. Neurochem., 36: 793-797, 1981. 10) Begg, C. S., pepper, D. S., Chesterman, C. N. and Morgan, F. J.: Complete covalent structure of human β-thromboglobulin. Biochem., 17: 1739-1744, 1978. 19) Kato, K., Hamaguchi, Y., Okawa, S., Ishikawa, E., Kobayashi, K. and Katunuma, N.: Use of rabbit antibody IgG-loaded silicone piece for the sandwich enzymoimmunoassay of macromoecular antigens. J. Biochem., 81: 1557-1566, 1977. 8) Hermodson, M., Schmer, G. and Kurachi, K.: Isolation, crystalization, and primary amino acid sequence of human platelet factor 4. J. Biol. Chem., 252: 6276-6279, 1977. 21) Kato, K., Suzuki, F. and Sembta, R.: Determination of brain enolase isozymes with an enzyme immunoassay at the level of single neurons. J. Neurochem., 37: 998-1005, 1981. 20) Kato, K., Fukui, H., Hamaguchi, Y. and Ishikawa, E.: Enzyme-linked immunoassay: Conjugation of the Fab' fragment of rabbit IgG with β-D-galactosidase from E. Coli and its use for immunoassay. J. Immunol., 116: 1554-1560, 1976. 7) Handin, R. I. and Cohen, H. J.: Purification and binding properties of human platelet factor four. J. Biol. Chem., 251: 4273-4282, 1976. 1) Ginsberg, M. H., Taylor, L. and Painter, R. G.: The mechanism of thrombin-induced platelet factor 4 secretion. Blood, 55: 661-668, 1980. |
References_xml | – reference: 8) Hermodson, M., Schmer, G. and Kurachi, K.: Isolation, crystalization, and primary amino acid sequence of human platelet factor 4. J. Biol. Chem., 252: 6276-6279, 1977. – reference: 4) More, S., Pepper, D. S. and Cash, J. D.: Platelet antiheparin activity. The isolation and characterization of platelet factor 4 released from thrombin-aggregated washed human platelets and its dissociation into subunits and the isolation of membrane-bound antiheparin activity. Biochim. Biophys. Acta, 379: 370-384, 1975. – reference: 20) Kato, K., Fukui, H., Hamaguchi, Y. and Ishikawa, E.: Enzyme-linked immunoassay: Conjugation of the Fab' fragment of rabbit IgG with β-D-galactosidase from E. Coli and its use for immunoassay. J. Immunol., 116: 1554-1560, 1976. – reference: 22) Kato, K., Suzuki, F. and Umeda, Y.: Highly sensitive immunoassay for three forms of rat brain enolase. J. Neurochem., 36: 793-797, 1981. – reference: 7) Handin, R. I. and Cohen, H. J.: Purification and binding properties of human platelet factor four. J. Biol. Chem., 251: 4273-4282, 1976. – reference: 23) Snyder, E. L., Hezzey, A., Katz, A. J. and Bock, J.: Occcurrence of the release reaction during preparation and storage of platelet concentrates. Vox Sang., 41: 172-177, 1981. – reference: 1) Ginsberg, M. H., Taylor, L. and Painter, R. G.: The mechanism of thrombin-induced platelet factor 4 secretion. Blood, 55: 661-668, 1980. – reference: 5) Rucinski, B., Niewiarowski, S., James, P., Walz, D. A. and Budzynski, A. Z.: Antiheparin proteins secreted by human platelets. Purification, characterization, and radioimmunoassay. Blood, 53: 47-62, 1979. – reference: 16) Bolton, A. E., Ludlam, C. A., Pepper, D. S., Moore, S. and Cash, J. D.: A radioimmunoassay for platelet factor 4. Thromb. Res., 8: 51-58, 1976. – reference: 18) Chesterman, C. N., McGready, J. R., Doyle, D. J. and Morgan, F. J.: Plasma levels of platelet factor 4 measured by radioimmunoassay. Brit. J. Haematol., 40: 489-500, 1978. – reference: 21) Kato, K., Suzuki, F. and Sembta, R.: Determination of brain enolase isozymes with an enzyme immunoassay at the level of single neurons. J. Neurochem., 37: 998-1005, 1981. – reference: 2) Kaplan, K. L. and Owen, J.: Plasma levels of β-thromboglobulin and platelet factor 4 as indices of platelet activation in vivo. Blood, 57: 199-202, 1981. – reference: 9) Deuel, T. F., Keim, P. S., Farmer, M. and Heinrikson, R. L.: Amino acid sequence of human platelet factor 4. Pro. Nat. Acad. Sci. U. S. A., 74: 2256-2258, 1977. – reference: 12) Kaplan, K. L., Broekman, M. J., Cherroff, A., Lesznik, G. R. and Drillings, M.: Platelet α-granule proteins: Studies on release and sub-cellular localization. Blood, 53: 604-618, 1979. – reference: 13) Nath, N., Lowery, C. T. and Niewiarowski, S.: Antigenic and antiheparin properties of human platelet factor 4 (PF4). Blood, 45: 537-550, 1975. – reference: 17) Kaplan, K. L., Nossel, H. L., Drillings, M. and Lesznik, G.: Radioimmunoassay of platelet factor 4 and β-thromboglobulin: Development and application to studies of platelet release in relation of fibrionopeptide A generation. Brit J. Haematol., 39: 129-146, 1978. – reference: 19) Kato, K., Hamaguchi, Y., Okawa, S., Ishikawa, E., Kobayashi, K. and Katunuma, N.: Use of rabbit antibody IgG-loaded silicone piece for the sandwich enzymoimmunoassay of macromoecular antigens. J. Biochem., 81: 1557-1566, 1977. – reference: 11) Ryo, R., Nakeff A., Huang, S. S., Ginsberg, M. and Deuel, T. F.: New synthesis of a platelet-specific protein: Platelet factor 4 synthesis in a megakaryocyte-enriched rabbit bone marrow culture system. J. Cell Biol., 96: 515-520, 1983. – reference: 14) Levine, S. P. and Krentz, L. S.: Development of a radioimmunoassay for human platelet factor 4. Thromb. Res., 11: 673-686, 1977. – reference: 6) Levine, S. P. and Wohl, H.: Human platelet factor 4: Purification and characterization by affinity chromatography. Purification of human platelet factor 4. J. Biol. Chem., 251: 324-328, 1976. – reference: 15) Files, J. C., Malpass, T. W., Yee, E. K., Ritchie, J. L. and Harker, L. A.: Studies of human platelet α-granule release in vivo. Blood, 58: 607-618, 1981. – reference: 3) Niewiaroski, S. and Thomas, D. P.: Platelet factor 4 and adenosine diphosphate release during human platelet aggregation. Nature, 222: 1269-1270, 1969. – reference: 10) Begg, C. S., pepper, D. S., Chesterman, C. N. and Morgan, F. J.: Complete covalent structure of human β-thromboglobulin. Biochem., 17: 1739-1744, 1978. |
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Title | 血小板第4因子のエンザイムイムノアッセイによる測定法の開発と血小板特異性 |
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