凍結赤血球液製造におけるプログラムフリーザー法とディープフリーザー法の比較
解凍赤血球液（Frozen-Thawed Red Cells：FTRCs）は，中間製品である凍結赤血球液（Frozen Red Cells：FRCs）として10年間保存可能であるため，まれな血液表現型を持つ患者にとって有用な血液製剤である．しかしながら，FTRCsは，凍結・融解工程に起因する溶血により，製品規格である総ヘモグロビン（Haemoglobin：Hb）含有量を満たさない場合がある．本研究では凍結工程に着目し，溶血を抑制することでFTRCsのHb含有量の向上を目指した．採血5日目（5-day-old：5D）または9週目（9-week-old：9W）の赤血球液（Red Blood Cel...
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| Published in | 日本輸血細胞治療学会誌 Vol. 69; no. 1; pp. 38 - 46 |
|---|---|
| Main Authors | , , , , , , , |
| Format | Journal Article |
| Language | Japanese |
| Published |
一般社団法人 日本輸血・細胞治療学会
25.02.2023
日本輸血・細胞治療学会 |
| Subjects | |
| Online Access | Get full text |
| ISSN | 1881-3011 1883-0625 |
| DOI | 10.3925/jjtc.69.38 |
Cover
| Abstract | 解凍赤血球液（Frozen-Thawed Red Cells：FTRCs）は，中間製品である凍結赤血球液（Frozen Red Cells：FRCs）として10年間保存可能であるため，まれな血液表現型を持つ患者にとって有用な血液製剤である．しかしながら，FTRCsは，凍結・融解工程に起因する溶血により，製品規格である総ヘモグロビン（Haemoglobin：Hb）含有量を満たさない場合がある．本研究では凍結工程に着目し，溶血を抑制することでFTRCsのHb含有量の向上を目指した．採血5日目（5-day-old：5D）または9週目（9-week-old：9W）の赤血球液（Red Blood Cells：RBCs）をグリセロール化し，プーリング後に2分割した．グリセロール化RBCsはプログラムフリーザー（Programmed Freezer：PF）法またはディープフリーザー（Deep Freezer：DF）法で凍結した．凍結4～8週間後，FRCsを融解して脱グリセロール化した．9Wの原料血液は，Hb回収率が低値で製品規格を満たさないFTRCsの模倣品とみた．結果，PF法はDF法より高いHb回収率を示した（5D：85.9±2.1 vs 81.1±3.5%，p＜0.001）（9W：56.8±4.0 vs 52.4±3.5%，p＜0.001）．赤血球内ATPおよび2,3-DPG量はPF法とDF法で変わらなかった．以上のことからPF法はDF法よりもグリセロール化RBCsの凍結に適していると考えられ，まれ血を対象としたFTRCsの安定供給に貢献すると考えられる． |
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| AbstractList | 解凍赤血球液 (Frozen-Thawed Red Cells : FTRCs) は, 中間製品である凍結赤血球液 (Frozen Red Cells : FRCs) として10年間保存可能であるため, まれな血液表現型を持つ患者にとって有用な血液製剤である. しかしながら, FTRCsは, 凍結・融解工程に起因する溶血により, 製品規格である総ヘモグロビン (Haemoglobin : Hb) 含有量を満たさない場合がある. 本研究では凍結工程に着目し, 溶血を抑制することでFTRCsのHb含有量の向上を目指した. 採血15日目 (5-day-old : 5D) または9週目 (9-week-old : 9W) の赤血球液 (Red Blood Cells : RBCs) をグリセロール化し, プーリング後に2分割した. グリセロール化RBCsはプログラムフリーザー (Programmed Freezer : PF) 法またはディープフリーザー (Deep Freezer : DF) 法で凍結した. 凍結4～8週間後, FRCsを融解して脱グリセロール化した. 9Wの原料血液は. Hb回収率が低値で製品規格を満たさないFTRCsの模倣品とみなした. 結果, PF法はDF法より高いHb回収率を示した (5D : 85.9±2.1 vs 81.1±3.5%, p<0.001) (9W : 56.8±4.0 vs 52.4±3.5%, p<0.001) . 赤血球内ATPおよび2,3-DPG量はPF法とDF法で変わらなかった. 以上のことからPF法はDF法よりもグリセロール化RBCsの凍結に適していると考えられ, まれ血を対象としたFTRCsの安定供給に貢献すると考えられる. 解凍赤血球液（Frozen-Thawed Red Cells：FTRCs）は，中間製品である凍結赤血球液（Frozen Red Cells：FRCs）として10年間保存可能であるため，まれな血液表現型を持つ患者にとって有用な血液製剤である．しかしながら，FTRCsは，凍結・融解工程に起因する溶血により，製品規格である総ヘモグロビン（Haemoglobin：Hb）含有量を満たさない場合がある．本研究では凍結工程に着目し，溶血を抑制することでFTRCsのHb含有量の向上を目指した．採血5日目（5-day-old：5D）または9週目（9-week-old：9W）の赤血球液（Red Blood Cells：RBCs）をグリセロール化し，プーリング後に2分割した．グリセロール化RBCsはプログラムフリーザー（Programmed Freezer：PF）法またはディープフリーザー（Deep Freezer：DF）法で凍結した．凍結4～8週間後，FRCsを融解して脱グリセロール化した．9Wの原料血液は，Hb回収率が低値で製品規格を満たさないFTRCsの模倣品とみた．結果，PF法はDF法より高いHb回収率を示した（5D：85.9±2.1 vs 81.1±3.5%，p＜0.001）（9W：56.8±4.0 vs 52.4±3.5%，p＜0.001）．赤血球内ATPおよび2,3-DPG量はPF法とDF法で変わらなかった．以上のことからPF法はDF法よりもグリセロール化RBCsの凍結に適していると考えられ，まれ血を対象としたFTRCsの安定供給に貢献すると考えられる． |
| Author | 田中, 光信 瀧原, 義宏 渕崎, 晶弘 保井, 一太 下垣, 一成 三橋, 久子 平山, 文也 木村, 貴文 |
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| CorporateAuthor | 日本赤十字社近畿ブロック血液センター |
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| PublicationTitle | 日本輸血細胞治療学会誌 |
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| PublicationYear | 2023 |
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| References | 1) Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology ISBT Working Party. https://www.isbtweb.org/ (2021/10/26 accessed). 19) Johan WM Lagerberg, Rosa Truijens-de Lange, Dirk De Korte, et al: Altered processing of thawed red cells to improve the in vitro quality during postthaw storage at 4°C. Transfusion, 47: 2242-2249, 2007. 21) Tamura S, Akino M, Sato M, et al: Extended storage of frozen thawed red cells following deglycerolization with an automated cell processor ACP215 and storage in additive solutions (in Japanese). Japanese Journal of Transfusion and Therapy, 55: 508-515, 2009. 23) Hansen AL, Kurach JDR, Turner TR, et al: The effect of processing method on the in vitro characteristics of red blood cell products. Vox Sang, 108: 350-358, 2015. 20) Turner TR, Lautner L, Hill A, et al: Evaluating the quality of red blood cell concentrates irradiated before or after cryopreservation. Transfusion, 60: 26-29, 2020. 10) Holovati JL, Wong KA, Webster JM, et al: The effects of cryopreservation on red blood cell microvesiculation, phosphatidylserine externalization, and CD47 expression. Transfusion, 48: 1658-1668, 2008. 6) Hess JR: Red cell freezing and its impact on the supply chain. Transfus Med, 14: 1-8, 2004. 12) Yang P, Zhou J, Kang Y, et al: Mannitol-adenine-phosphate: a novel solution for intraoperative blood salvage. Transfusion, 54: 1146-1152, 2014. 13) Hornblower M, Meryman HT: Relative efficiency and interchangeability of Huggins and American Red Cross red cell freezing procedures. Transfusion, 17: 417-424, 1977. 22) Cicha I, Suzuki Y, Tateishi N, et al: Gamma-Ray-Irradiated Red Blood Cells Stored in Mannitol-Adenine-Phosphate Medium: Rheological Evaluation and Susceptibility to Oxidative Stress. Vox Sang, 79: 75-82, 2003. 2) Lecak J, Scott K, Young C, et al: Evaluation of red blood cells stored at -80°C in excess of 10 years. Transfusion, 44: 1306-1313, 2004. 24) Kuypers FA, van Linde-Sibenius Trip M, Roelofsen B, et al: The phospholipid organisation in the membranes McLeod and Leach phenotype erythrocytes. FEBS Lett, 184: 20-24, 1985. 17) Hogma CF: Preparation and preservation of red cells. Vox Sang, 74 (Suppl 2): 177-187, 1998. 7) Lovelock JE: The hemolysis of human red blood-cells by freezing and thawing. Biochim Biophys Acta, 10: 414-426, 1953. 9) Kobayashi R, Kanesaka N, Watanabe M, et al: Effect of the breaking temperature of supercooling on ice characteristics and drip loss of foods in supercooled freezing method (in Japanese). Transactions of Japan Society of Refrigeration and Air Conditioning Engineers, 31: 297-303, 2014. 4) Valeri CR: Simplification of the methods for adding and removing glycerol during freeze-preservation of human red blood cells with the high or low glycerol methods: biochemical modification prior to freezing. Transfusion, 15: 195-218, 1975. 11) Gelderman MP, Vostal JG: Rejuvenation improves roller pump-induced physical stress resistance of fresh and stored red blood cells. Transfusion, 51: 1096-1104, 2011. 16) Parpart AK, Lorenz PB, Parpart ER, et al: The osmotic resistance (fragility) of human red cells. J Clin Invest, 26: 636-640, 1947. 15) Takayanagi M, Yashiro T: Development of a new colorimetric determination of hemoglobin in plasma. Jpn J Clin Chem, 14: 247-252, 1985. 5) Krijnen HW, de Wit JJ, Kuivenhoven AC, et al: Glycerol treated human red cells frozen with liquid nitrogen. Vox Sang, 9: 559-572, 1964. 14) Kikuchi G, Kurita R, Ogasawara K, et al: Application of immortalized human erythroid progenitor cell line in serologic tests to detect red blood cell alloantibodies. Transfusion, 58: 2675-2682, 2018. 3) Meryman HT, Hornblower M: A method for freezing and washing red blood cells using a high glycerol concentration. Transfusion, 12: 145-156, 1972. 8) Meryman HT: Red cell freezing by the American National Red Cross. Am J Med Technol, 41: 265-282, 1975. 18) Valeri CR, Srey R, Tilahun D, et al: The in vitro quality of red blood cells frozen with 40 percent (wt/vol) glycerol at -80°C for 14 years, deglycerolized with the Heamonetics ACP215, and stored at 4°C in additive solution-1 or additive solution-3 for up to 3 weeks. Transfusion, 44: 990-995, 2004. |
| References_xml | – reference: 6) Hess JR: Red cell freezing and its impact on the supply chain. Transfus Med, 14: 1-8, 2004. – reference: 10) Holovati JL, Wong KA, Webster JM, et al: The effects of cryopreservation on red blood cell microvesiculation, phosphatidylserine externalization, and CD47 expression. Transfusion, 48: 1658-1668, 2008. – reference: 17) Hogma CF: Preparation and preservation of red cells. Vox Sang, 74 (Suppl 2): 177-187, 1998. – reference: 7) Lovelock JE: The hemolysis of human red blood-cells by freezing and thawing. Biochim Biophys Acta, 10: 414-426, 1953. – reference: 3) Meryman HT, Hornblower M: A method for freezing and washing red blood cells using a high glycerol concentration. Transfusion, 12: 145-156, 1972. – reference: 14) Kikuchi G, Kurita R, Ogasawara K, et al: Application of immortalized human erythroid progenitor cell line in serologic tests to detect red blood cell alloantibodies. Transfusion, 58: 2675-2682, 2018. – reference: 23) Hansen AL, Kurach JDR, Turner TR, et al: The effect of processing method on the in vitro characteristics of red blood cell products. Vox Sang, 108: 350-358, 2015. – reference: 11) Gelderman MP, Vostal JG: Rejuvenation improves roller pump-induced physical stress resistance of fresh and stored red blood cells. Transfusion, 51: 1096-1104, 2011. – reference: 13) Hornblower M, Meryman HT: Relative efficiency and interchangeability of Huggins and American Red Cross red cell freezing procedures. Transfusion, 17: 417-424, 1977. – reference: 18) Valeri CR, Srey R, Tilahun D, et al: The in vitro quality of red blood cells frozen with 40 percent (wt/vol) glycerol at -80°C for 14 years, deglycerolized with the Heamonetics ACP215, and stored at 4°C in additive solution-1 or additive solution-3 for up to 3 weeks. Transfusion, 44: 990-995, 2004. – reference: 22) Cicha I, Suzuki Y, Tateishi N, et al: Gamma-Ray-Irradiated Red Blood Cells Stored in Mannitol-Adenine-Phosphate Medium: Rheological Evaluation and Susceptibility to Oxidative Stress. Vox Sang, 79: 75-82, 2003. – reference: 5) Krijnen HW, de Wit JJ, Kuivenhoven AC, et al: Glycerol treated human red cells frozen with liquid nitrogen. Vox Sang, 9: 559-572, 1964. – reference: 2) Lecak J, Scott K, Young C, et al: Evaluation of red blood cells stored at -80°C in excess of 10 years. Transfusion, 44: 1306-1313, 2004. – reference: 8) Meryman HT: Red cell freezing by the American National Red Cross. Am J Med Technol, 41: 265-282, 1975. – reference: 16) Parpart AK, Lorenz PB, Parpart ER, et al: The osmotic resistance (fragility) of human red cells. J Clin Invest, 26: 636-640, 1947. – reference: 4) Valeri CR: Simplification of the methods for adding and removing glycerol during freeze-preservation of human red blood cells with the high or low glycerol methods: biochemical modification prior to freezing. Transfusion, 15: 195-218, 1975. – reference: 15) Takayanagi M, Yashiro T: Development of a new colorimetric determination of hemoglobin in plasma. Jpn J Clin Chem, 14: 247-252, 1985. – reference: 24) Kuypers FA, van Linde-Sibenius Trip M, Roelofsen B, et al: The phospholipid organisation in the membranes McLeod and Leach phenotype erythrocytes. FEBS Lett, 184: 20-24, 1985. – reference: 19) Johan WM Lagerberg, Rosa Truijens-de Lange, Dirk De Korte, et al: Altered processing of thawed red cells to improve the in vitro quality during postthaw storage at 4°C. Transfusion, 47: 2242-2249, 2007. – reference: 21) Tamura S, Akino M, Sato M, et al: Extended storage of frozen thawed red cells following deglycerolization with an automated cell processor ACP215 and storage in additive solutions (in Japanese). Japanese Journal of Transfusion and Therapy, 55: 508-515, 2009. – reference: 9) Kobayashi R, Kanesaka N, Watanabe M, et al: Effect of the breaking temperature of supercooling on ice characteristics and drip loss of foods in supercooled freezing method (in Japanese). Transactions of Japan Society of Refrigeration and Air Conditioning Engineers, 31: 297-303, 2014. – reference: 20) Turner TR, Lautner L, Hill A, et al: Evaluating the quality of red blood cell concentrates irradiated before or after cryopreservation. Transfusion, 60: 26-29, 2020. – reference: 12) Yang P, Zhou J, Kang Y, et al: Mannitol-adenine-phosphate: a novel solution for intraoperative blood salvage. Transfusion, 54: 1146-1152, 2014. – reference: 1) Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology ISBT Working Party. https://www.isbtweb.org/ (2021/10/26 accessed). |
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| SourceID | medicalonline jstage |
| SourceType | Publisher |
| StartPage | 38 |
| SubjectTerms | ディープフリーザー プログラムフリーザー ヘモグロビン回収率 凍結融解 溶血 |
| Title | 凍結赤血球液製造におけるプログラムフリーザー法とディープフリーザー法の比較 |
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| ispartofPNX | 日本輸血細胞治療学会誌, 2023/02/25, Vol.69(1), pp.38-46 |
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