アスコルビン酸を用いた電子顕微鏡観察のための脱灰法
アスコルビン酸による脱灰法を用いて, 哺乳類の未完成の歯を脱灰し, 透過電子顕微鏡で観察した。エナメル質と象牙質の所見をEDTAによって脱灰したものと比較し, アスコルビン酸脱灰法の特徴を検索した。 L-アスコルビン酸はイヌの歯胚をEDTAの4~5倍の速さで脱灰した。また,エナメル質と象牙質の有機基質をEDTAと同様,良好に保存した。特に, エナメル質基質は脱灰後に著明に残った。大きな脱灰速度と有機基質の保存性は, アスコルビン酸脱灰法のすぐれた特性である。大きな脱灰速度は研究の能率を上げ, また脱灰中の試料からの種々の物質の好ましくない溶出を防ぎ, 試料の変化を最小におさえ, また, 有機基...
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Published in | 歯科基礎医学会雑誌 Vol. 25; no. 3; pp. 691 - 699 |
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Main Authors | , , |
Format | Journal Article |
Language | Japanese |
Published |
歯科基礎医学会
1983
|
Online Access | Get full text |
ISSN | 0385-0137 |
DOI | 10.2330/joralbiosci1965.25.691 |
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Abstract | アスコルビン酸による脱灰法を用いて, 哺乳類の未完成の歯を脱灰し, 透過電子顕微鏡で観察した。エナメル質と象牙質の所見をEDTAによって脱灰したものと比較し, アスコルビン酸脱灰法の特徴を検索した。 L-アスコルビン酸はイヌの歯胚をEDTAの4~5倍の速さで脱灰した。また,エナメル質と象牙質の有機基質をEDTAと同様,良好に保存した。特に, エナメル質基質は脱灰後に著明に残った。大きな脱灰速度と有機基質の保存性は, アスコルビン酸脱灰法のすぐれた特性である。大きな脱灰速度は研究の能率を上げ, また脱灰中の試料からの種々の物質の好ましくない溶出を防ぎ, 試料の変化を最小におさえ, また, 有機基質の良好な保存性はエナメル質超徴形態の発生学的検索に有用であろうことが示された。さらに, アスコルビン酸脱灰法は,EDTA脱灰法と競合することなく, 硬組織研究のための新しい方法の一つとして発展性があることが示された。 |
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AbstractList | アスコルビン酸による脱灰法を用いて, 哺乳類の未完成の歯を脱灰し, 透過電子顕微鏡で観察した。エナメル質と象牙質の所見をEDTAによって脱灰したものと比較し, アスコルビン酸脱灰法の特徴を検索した。 L-アスコルビン酸はイヌの歯胚をEDTAの4~5倍の速さで脱灰した。また,エナメル質と象牙質の有機基質をEDTAと同様,良好に保存した。特に, エナメル質基質は脱灰後に著明に残った。大きな脱灰速度と有機基質の保存性は, アスコルビン酸脱灰法のすぐれた特性である。大きな脱灰速度は研究の能率を上げ, また脱灰中の試料からの種々の物質の好ましくない溶出を防ぎ, 試料の変化を最小におさえ, また, 有機基質の良好な保存性はエナメル質超徴形態の発生学的検索に有用であろうことが示された。さらに, アスコルビン酸脱灰法は,EDTA脱灰法と競合することなく, 硬組織研究のための新しい方法の一つとして発展性があることが示された。 「緒言」 歯や骨等の硬組織の有機基質やそれらの形成組織およびこれらの硬組織の周囲の細胞を観察する目的で, また, 硬組織が混在している組織では, 単純に薄切の困難さを避ける目的で, 固定の後に試料の脱灰処理がさまざまの方法で行なわれる. 光学顕微鏡観察のためには, 通常ギ酸をはじめとする各種の酸が用いられている. 透過電子顕微鏡観察のためには, 酸は細胞の微細構造の保存性が良くないために用いられることが少なく, 専らEDTA(Ethylenediamine tetraacetic acid)が用いられる. EDTAは元来Nikiforuk and Sreebny, (1953)によって, 骨の光学顕微鏡的組織化学のために用いられたものであるが, 脱灰が中性領域で行なわれるため, 細胞の超微構造の保存が非常に良好で, かつ数種の酵素活性も保存されるので, 硬織組を含む種々の組織の電子顕微鏡観察のための唯一の脱灰法として賞用されてきた. |
Author | 塩井, 孝 脇田, 稔 小林, 身哉 |
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PublicationTitle | 歯科基礎医学会雑誌 |
PublicationTitleAlternate | 歯基礎誌 |
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Publisher | 歯科基礎医学会 |
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References | 4) Frank, R.-M.:Étude au microscope électronique de lémail human adulte. Rapports existant entre le réseau fibrillaire organique et les cristaux d'apatite. Actualités odontostomat. 13: 13-35, 1959. 10) Nikiforuk, G. and Sreebny, L.: Demineralization of hard tissues by organic chelating agents at neutral pH. J. Dent. Res. 32: 859-867, 1953. 12) Scott, D. B., Ussing, M. J., Sognnaes, R. F. and Wyckoff, R. W. G.: Electron microscopy of mature human enamel. J. Dent. Res. 31: 74-85, 1952. 17) 脇田稔, 小林身哉: 電子顕微鏡のための脱灰法. 解剖誌57: 308, 1982. 6) Hinrichsen, C. F. L. and Engel, M. B.: Fine structure of partially demineralized enamel. Archs. oral Biol. 11: 65-93, 1966. 7) Johansen, E.: Microstructure of enamel and dentin. J. Dent. Res. 43: 1007-1020, 1964. 16) Wakita, M., Tsuchiya, H., Gunji, T. and Kobayashi, S.: Three-dimensional structure of Tomes' processes and enamel prism formation in the kitten. Arch. histol. jpn 44: 285-297, 1981. 18) Wakita, M. and Kobayashi, S.: The three dimensional structure of Tomes' processes and the development of the microstructural organnization of tooth enamel. In: Mechanisms of Tooth Enamel Formation., S. Suga (ed.) Quintessence Pub., Co., Inc., Tokyo, Berlin, Chicago, Rio de Janeiro, pp65-89, 1983. 20) Warshawsky, H. and Moore, G.: A technique for the fixation and decalcification of rat incisors for electron microscopy. J. Histochem. Cytochem. 15: 542-549, 1967. 11) Rannholm, E.: An electron microscopic study of the amelogenesis in human teeth I. The fine structure of the ameloblasts. J. Ultrastr. Res. 6: 229-248, 1962. 8) Kurahashi, Y.: Perfusion fixation with glutaraldehyde and its application for cytochemistry of developing teeth. J. Electron Microscopy 14: 337-338, 1965. 15) 柳沢孝彰, 田熊庄三郎: 超徴構造的にみた琺瑯質の有機性基質と結晶の関係. 歯基礎誌24: 777-787, 1982. 14) Sundstrorn, B. and Zelander, J.: On the morphological organization of the organic matrix of adult human enamel after decalcification by means of a basic chromium (DI) sulphate solution. Odont. Revy 19: 249-263, 1968. 1) Bernick, S., Baker, R. F., Rutherford, R. L. and Warren, O.: Electron microscopy of enamel and dentin,. J. Amer. Dent. Assoc. 45: 689-696, 1952. 2) Brain, E. B.: The Preparation of Decalcified Sections. Charles C Thomas, Springfield, Illinois, 1966. 3) Dietrich, H. F. and Fontaine, A. R.: A decalcification method for ultrastructure of echinoderm tissues. Stain Technol. 50: 351-354, 1975. 13) 塩田研次, 王村維康, 伊集院直邦, 石田武, 志築昭和, 宮田光男: 成熟エナメル質の脱灰切片作製に関する一改良法. 歯基礎誌10: 149-158, 1969. 5) Glas, J.-E and Nylen, M. U.: A correlated electron microscopic and microradiographic study of human enamel. Archs. oral Biol. 10: 893-908, 1965. 9) Nalbandian, J. and Frank, R. M.: Microscopie électronique des gaines, des structures prismatiques et interprismatiques de l'émail foetal humain. Bull. Group Int. Rech. Sc. Stomat. 5: 523-542, 1962. 19) Wakita, M., Kobayashi, M., Shioi, S.: Decalcification for electron microscopy with L-ascorbic acid. Stain Technol.(in press, 1983). |
References_xml | – reference: 10) Nikiforuk, G. and Sreebny, L.: Demineralization of hard tissues by organic chelating agents at neutral pH. J. Dent. Res. 32: 859-867, 1953. – reference: 8) Kurahashi, Y.: Perfusion fixation with glutaraldehyde and its application for cytochemistry of developing teeth. J. Electron Microscopy 14: 337-338, 1965. – reference: 20) Warshawsky, H. and Moore, G.: A technique for the fixation and decalcification of rat incisors for electron microscopy. J. Histochem. Cytochem. 15: 542-549, 1967. – reference: 17) 脇田稔, 小林身哉: 電子顕微鏡のための脱灰法. 解剖誌57: 308, 1982. – reference: 9) Nalbandian, J. and Frank, R. M.: Microscopie électronique des gaines, des structures prismatiques et interprismatiques de l'émail foetal humain. Bull. Group Int. Rech. Sc. Stomat. 5: 523-542, 1962. – reference: 19) Wakita, M., Kobayashi, M., Shioi, S.: Decalcification for electron microscopy with L-ascorbic acid. Stain Technol.(in press, 1983). – reference: 14) Sundstrorn, B. and Zelander, J.: On the morphological organization of the organic matrix of adult human enamel after decalcification by means of a basic chromium (DI) sulphate solution. Odont. Revy 19: 249-263, 1968. – reference: 4) Frank, R.-M.:Étude au microscope électronique de lémail human adulte. Rapports existant entre le réseau fibrillaire organique et les cristaux d'apatite. Actualités odontostomat. 13: 13-35, 1959. – reference: 15) 柳沢孝彰, 田熊庄三郎: 超徴構造的にみた琺瑯質の有機性基質と結晶の関係. 歯基礎誌24: 777-787, 1982. – reference: 2) Brain, E. B.: The Preparation of Decalcified Sections. Charles C Thomas, Springfield, Illinois, 1966. – reference: 6) Hinrichsen, C. F. L. and Engel, M. B.: Fine structure of partially demineralized enamel. Archs. oral Biol. 11: 65-93, 1966. – reference: 7) Johansen, E.: Microstructure of enamel and dentin. J. Dent. Res. 43: 1007-1020, 1964. – reference: 1) Bernick, S., Baker, R. F., Rutherford, R. L. and Warren, O.: Electron microscopy of enamel and dentin,. J. Amer. Dent. Assoc. 45: 689-696, 1952. – reference: 13) 塩田研次, 王村維康, 伊集院直邦, 石田武, 志築昭和, 宮田光男: 成熟エナメル質の脱灰切片作製に関する一改良法. 歯基礎誌10: 149-158, 1969. – reference: 11) Rannholm, E.: An electron microscopic study of the amelogenesis in human teeth I. The fine structure of the ameloblasts. J. Ultrastr. Res. 6: 229-248, 1962. – reference: 16) Wakita, M., Tsuchiya, H., Gunji, T. and Kobayashi, S.: Three-dimensional structure of Tomes' processes and enamel prism formation in the kitten. Arch. histol. jpn 44: 285-297, 1981. – reference: 18) Wakita, M. and Kobayashi, S.: The three dimensional structure of Tomes' processes and the development of the microstructural organnization of tooth enamel. In: Mechanisms of Tooth Enamel Formation., S. Suga (ed.) Quintessence Pub., Co., Inc., Tokyo, Berlin, Chicago, Rio de Janeiro, pp65-89, 1983. – reference: 5) Glas, J.-E and Nylen, M. U.: A correlated electron microscopic and microradiographic study of human enamel. Archs. oral Biol. 10: 893-908, 1965. – reference: 3) Dietrich, H. F. and Fontaine, A. R.: A decalcification method for ultrastructure of echinoderm tissues. Stain Technol. 50: 351-354, 1975. – reference: 12) Scott, D. B., Ussing, M. J., Sognnaes, R. F. and Wyckoff, R. W. G.: Electron microscopy of mature human enamel. J. Dent. Res. 31: 74-85, 1952. |
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Title | アスコルビン酸を用いた電子顕微鏡観察のための脱灰法 |
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