シーケンシング反応における鋳型DNA微量時の反応条件の検討

• Published in: 生物物理化学 Vol. 35; no. 1; pp. 49 - 52
• Main Authors: 藤田, 雅彦, 神原, 秀記, 村川, 克二
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: 日本電気泳動学会 1991
• ISSN: 0031-9082; 1349-9785
• DOI: 10.2198/sbk.35.49

プラスチック容器壁に一本鎖鋳型DNAが吸着する現象を見いだした. サンガー法によるシーケンシング反応では, 鋳型DNA量が微量のときにはこの吸着の影響が顕著に現れる. プラスチック容器壁へのDNA吸着量は単位接触面積当り2fmol/mm2であった. ポリオキシエチレン (20) ソルビタンモノラウレートを反応液に添加することにより, DNA吸着量を低減できた. この方法によりわずか0.05pmol鋳型DNAからも解析可能なDNA断片群を調製できた.