ニホンナシのポリフェノール酸化酵素の精製とその性質およびL-エピカテキン酸化酵素活性

(1) 摘果期のニホンナシ幼果の抽出液から,硫安分画後のDEAE-トヨパールクロマトグラフィーにより,3種類のPPO (F-1,F-IIおよびF-III)がほぼ完全に分離された. (2) F-Iについては,さらにセファデックスG-100によるゲル濾過を行い,ディスク電気泳動的に均一な状態に精製した.その分子量は約56,000と推定された. (3) F-1はクロロゲン酸(Chl),L-エピカテキン(Epi)などのO-ジフェノール類を酸化したが,m-,p-ジフェノールおよびモノフェノールには不活性であった.その最適pHは4.2であり,3~5と活性pH域がきわめて狭い酸性PPOであった. (4) F...

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Published in日本農芸化学会誌 Vol. 60; no. 9; pp. 705 - 712
Main Authors 川崎, 宏隆, 藤田, 修二, 李, 忠富, 東野, 哲三
Format Journal Article
LanguageJapanese
Published 公益社団法人 日本農芸化学会 1986
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ISSN0002-1407
1883-6844
DOI10.1271/nogeikagaku1924.60.705

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Summary:(1) 摘果期のニホンナシ幼果の抽出液から,硫安分画後のDEAE-トヨパールクロマトグラフィーにより,3種類のPPO (F-1,F-IIおよびF-III)がほぼ完全に分離された. (2) F-Iについては,さらにセファデックスG-100によるゲル濾過を行い,ディスク電気泳動的に均一な状態に精製した.その分子量は約56,000と推定された. (3) F-1はクロロゲン酸(Chl),L-エピカテキン(Epi)などのO-ジフェノール類を酸化したが,m-,p-ジフェノールおよびモノフェノールには不活性であった.その最適pHは4.2であり,3~5と活性pH域がきわめて狭い酸性PPOであった. (4) F-Iの最適温度は35°付近にみられ,それは他の植物PPOに比べ比較的高い温度でも安定であった.本酵素はシアン化カリウム,フッ化ナトリウムおよび塩化物によって阻害された. (5) F-IIおよびF-IIIの最適pHはEpiやカテコールを基質とした場合7~7.5にみられ,とくに同pHにおけるEpi酸化活性(EpO)が他のPPO活性に比べて著しく高かった.一方chlを基質とした場合は4付近に最適値がみられた.しかし,その活性は最大EpO活性の約20%にすぎなかった.
ISSN:0002-1407
1883-6844
DOI:10.1271/nogeikagaku1924.60.705