Duale genetische Kodierung von Acetyllysin und nicht-hydrolysierbarem Thioacetyllysin mittels Flexizym

• Published in: Angewandte Chemie Vol. 128; no. 12; pp. 4151 - 4154
• Main Authors: Xiong, Hai, Reynolds, Noah M., Fan, Chenguang, Englert, Markus, Hoyer, Denton, Miller, Scott J., Söll, Dieter
• Format: Journal Article
• Language: German
• Published: Weinheim Blackwell Publishing Ltd 14.03.2016; Wiley Subscription Services, Inc
• Subjects: Chemistry; Deoxyribonucleic acid; DNA; Flexizym-Technik; Histone; Lysin-Acetylierung; Posttranslationale Modifikationen; Thioacetyllysin
• ISSN: 0044-8249; 1521-3757
• DOI: 10.1002/ange.201511750

Die Acetylierung von Lysin-Bausteinen ist eine wichtige posttranslationale Proteinmodifikation. Die Lysin-Acetylierung in Histonproteinen und deren Interaktion mit anderen posttranslationalen Modifikationen in Histon- und nicht-Histon-Proteinen ist essentiell bei der DNA-Replikation, DNA-Reparatur und Transkriptionsregulation. Wir verwendeten die Flexizym-Technologie, um die Aminosäuren Acetyllysin (AcK) und nicht-hydrolysierbares Thioacetyllysin (ThioAcK) invitro in intakte Proteine einzubauen. ThioAcK und AcK wurden in humanes Histon H3 positionsspezifisch inkorporiert. Dies erfolgte entweder individuell oder paarweise bei verschiedenen Lysin-Positionen innerhalb des humanen Histon H3. Die Thioacetylgruppe im Histon H3 konnte nicht durch die Histon-Deacetylase Sirtuin (Typ 1) abgespalten werden, wie durch diese Studie gezeigt wurde. Diese Methode des AcK- und ThioAcK-Einbaus stellt ein wichtiges Werkzeug fur die Untersuchung der Protein-Acetylierung sowie deren Rolle in der Interaktion mit weiteren posttranlationalen Modifizierungen dar.