Inductive Role of Sustentacular Cells en las Células Madre Mesenquimales Derivadas de la Médula Ósea

• Published in: International journal of morphology Vol. 35; no. 4; p. 1597
• Main Authors: Monfared, Mahdieh Hajian, Akbari, Mohammad, kashani, Iraj Ragerdi, Solhjoo, Somayeh, Tooli, Heidar, Omidi, Ameneh, Aliakbari, Freshteh, Ijaz, Sahar, Mokhtari, Tahmineh, Rastegar, Tayebeh
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: Universidad de La Frontera, Facultad de Medicina 01.12.2017
• Subjects: Irán
• ISSN: 0717-9367; 0717-9502

Male germ line stem cells are key factors for male spermatogenesis and fertility. Sustentacular cells (Sertoli cells) as somatic cells play a pivotal role in creating essential microenvironment for the self-renewal and differentiation of the male germ line cells. Mesenchymal stem cells are recognized as self-renewing and multipotent cells able to differentiate into multiple cell types. The generation of male germ cells from mesenchymal stem cells may provide a therapeutic method to treat male infertility. In this study, Bone marrow derived mesenchymal cells (BMMSCs) were retrieved from the bone marrow of 6-8-week old Naval Medical Research Institute (NMRI) mice. Sustentacular cells (Sertoli cells) were isolated and made rich using lectin coated plates. Sustentacular cell condition medium (SCCM) was collected after different time intervals. Then the BMMSCs were cultured with different concentration of SCCM and Dulbecco's Modified Eagle's medium (DMEM) at various times. Specific markers of Germ line cells were evaluated by using Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunocytochemistry. The results showed that BMMSCs cultured with SCCM for 48h exhibited germ line specific transcripts (Mvh, Iid4, piwil2) (p< 0.05) and markers (Mvh, Scp3). Our findings represent that culturing BMMSCs with SCCM may lead to effective differentiation of BMMSCs into germline cells and provide a treatment strategy for male infertility. KEY WORDS: Sustentacular cells conditioned medium; Bone marrow derived Mesenchymal stem cells; Differentiation; Culture. Las celulas madre de la linea germinal masculina son factores clave para la espermatogenesis masculina y la fertilidad. Las celulas sustentaculares (celulas de Sertoli) como celulas somaticas juegan un papel fundamental en la creacion de un microambiente esencial para la auto-renovacion y diferenciacion de las celulas de la linea germinal masculina. Las celulas madre mesenquimales son reconocidas como celulas auto-renovables y multipotentes capaces de diferenciarse en multiples tipos de celulas. La generacion de celulas germinales masculinas a partir de celulas madre mesenquimales puede proporcionar un metodo terapeutico para tratar la infertilidad masculina. En este estudio, las celulas mesenquimales derivadas de la medula osea (BMMSCs) se recuperaron de la medula osea de ratones de 6-8 semanas de edad del Instituto de Investigacion Medico Naval (NMRI). En el estudio se aislaron las celulas sustentaculares y se enrriquecieron usando placas revestidas con lectina. Se obtuvo el medio de condicion celular despues de diferentes intervalos de tiempo. Posteriormente se cultivaron las BMMSC con diferentes concentraciones de SCCM y medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) en diversos momentos. Se evaluaron marcadores especificos de celulas de linea germinal usando la reaccion en cadena de polimerasa transcriptasa inversa (RT-PCR) e inmunocitoquimica. Los resultados mostraron que las BMMSCs cultivadas con SCCM durante 48h exhibieron transcritos especificos de linea germinal (Mvh, Iid4, piwil2) (p <0,05) y marcadores (Mvh, Scp3). Nuestros resultados indican que el cultivo de BMMSCs con SCCM puede conducir a la diferenciacion efectiva de BMMSCs en celulas germinales y proporcionar una estrategia de tratamiento para la infertilidad masculina. PALABRAS CLAVE: Medio acondicionado con celulas sustentaculares; Celulas madre mesenquimales derivadas de medula osea; Diferenciacion; Cultivo.