Vírus da artrite encefalite caprina: isolamento e caracterização de parte do gene gag

• Published in: Arquivo brasileiro de medicina veterinária e zootecnia Vol. 56; no. 2; pp. 135 - 142
• Main Authors: Lima, P.P.(Universidade Federal de Minas Gerais Escola de Veterinária), Rocha, M.A.(Universidade Federal de Minas Gerais Escola de Veterinária), Stancek, D.(Universidade Federal de Minas Gerais Escola de Veterinária), Gouveia, A.M.G.(Universidade Federal de Minas Gerais Escola de Veterinária), Oliveira, G.D.R.(Universidade Federal de Minas Gerais Escola de Veterinária)
• Format: Journal Article
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal de Minas Gerais, Escola de Veterinária 2004
• Subjects: análise filogenética; caprine arthritis-encephalitis virus; isolamento; PCR; phylogenetic analysis; VETERINARY SCIENCES; virus isolation; vírus da artrite-encefalite caprina; caprine arthritis-encephalitis virus; isolamento; phylogenetic analysis; análise filogenética; virus isolation; PCR; vírus da artrite-encefalite caprina
• ISSN: 0102-0935; 1678-4162; 1678-4162
• DOI: 10.1590/s0102-09352004000200001

Amostras de sangue de 12 animais soropositivos pelo teste de imunodifusão em gel de agarose e que não apresentavam sinais clínicos sugestivos de infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) foram coletadas para isolamento viral. Mácrofagos derivados de monócitos foram co-cultivados com células de membrana sinovial caprina (MSC), resultando em cinco amostras que apresentaram efeito citopático característico do tipo persistente, semelhante ao observado para o CAEV. Uma técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) foi padronizada para amplificar parte do gene gag do genoma pró-viral, codificante para a proteína do capsídeo viral (p25). As cinco amostras foram amplificadas pela PCR e três delas, BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 e BR-UFMG/PL3, foram seqüenciadas diretamente dos seus produtos de PCR. O alinhamento múltiplo das seqüências obtidas com outras de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), obtidas no GenBank, e o dendrograma revelaram que as novas amostras de CAEV são únicas e distintas das demais amostras de LVPR, possuindo maior identidade de nucleotídeos e aminoácidos entre si e com as amostras de CAEV do que com a do vírus maedi-visna. Blood samples from 12 seropositive animals by agar gel immunodifusion test (AGID) showing no evident clinical signs of disease were taken to attempt caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) isolation. Monocyte-derived macrophages were co-cultured with goat synovial membrane cells (GSM) resulting in five virus isolations, which presented cytophatic effects of the persistent type, resembling those observed for CAEV. A polymerase chain reaction (PCR) assay was designed to amplify a portion of the gag proviral gene coding for the major core protein (p25). All of the five isolates were amplified by this PCR and three of them named BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 and BR-UFMG/PL3, were sequenced directly from their PCR products. Multiple sequence analysis and a dendrogram including other sequences from the GenBank database showed that these Brazilian isolates are unique and distinct from those of known caprine and ovine lentiviruses, with a higher identity of nucleotide and deduced aminoacids to each other and to CAEV than to maedi-visna virus.