Caracterização do gene vip3A e toxicidade da proteína Vip3Aa50 à lagarta-do-cartucho e à lagarta-da-soja

• Published in: Pesquisa agropecuaria brasileira Vol. 48; no. 9; pp. 1220 - 1227
• Main Authors: Figueiredo, Camila Soares, Marucci, Suzana Cristina, Tezza, Renata Izabel Dozzi, Lemos, Manoel Victor Franco, Desidério, Janete Apparecida
• Format: Journal Article
• Language: English; Portuguese
• Published: Embrapa Secretaria de Pesquisa e Desenvolvimento; Pesquisa Agropecuária Brasileira 01.09.2013; Embrapa Informação Tecnológica
• Subjects: AGRICULTURE, DAIRY & ANIMAL SCIENCE; AGRICULTURE, MULTIDISCIPLINARY; Anticarsia gemmatalis; controle biológico; expressão heteróloga; proteína inseticida vegetativa; Spodoptera frugiperda; vegetative insecticidal protein; controle biológico; proteína inseticida vegetativa; Anticarsia gemmatalis; Spodoptera frugiperda; expressão heteróloga; biological control; heterologous expression
• ISSN: 1678-3921
• DOI: 10.1590/S0100-204X2013000900005

O objetivo deste trabalho foi caracterizar o gene vip3A de Bacillus thuringiensis e verificar a toxicidade da proteína Vip3Aa50 a larvas da lagarta-do-cartucho (Spodoptera frugiperda) e da lagarta-da-soja (Anticarsia gemmatalis). O gene vip3A foi amplificado por PCR, com iniciadores específicos, e gerou um fragmento de 2.370 pb. Esse fragmento foi clonado em vetor pGEM-T Easy e, em seguida, sequenciado, subclonado em vetor de expressão pET-28a (+) e inserido em células de Escherichia coli BL21 (DE3). A expressão da proteína Vip3Aa50 foi induzida por isopropil-β-D-1-tiogalactopiranosídeo (IPTG), visualizada em SDS-PAGE e detectada por "Western blot". Os ensaios de toxicidade revelaram alta atividade da proteína Vip3Aa50 contra as larvas neonatas da lagarta-da-soja e da lagarta-do-cartucho, com CL50 de 20,3 e 79,6 ng cm-2, respectivamente. O gene vip3Aa50 é um novo gene da classe vip3A.