Efecto de dosis suprafisiológicas de calcitriol sobre la expresión proteica de células de músculo liso vascular

• Published in: Revista de osteoporosis y metabolismo mineral Vol. 9; no. 4; pp. 130 - 138
• Main Authors: Carrillo López, Tuñón LePoultel, Quirós Caso, Rodríguez, Cannata Andía, JB, Naves Díaz
• Format: Journal Article
• Language: Portuguese; English
• Published: Sociedad Española de Investigaciones Óseas y Metabolismo Mineral 01.12.2017; Ibáñez & Plaza Asoc
• Subjects: calcificación vascular; calcitriol; Endocrinology & Metabolism; proteómica; proteomics; calcitriol; calcificación vascular; vascular calcification
• ISSN: 2173-2345; 1889-836X; 2173-2345
• DOI: 10.4321/s1889-836x2017000400005

Resumen Introducción: El calcitriol, fundamental para mantener la homeostasis del calcio y el fósforo en el organismo, puede perjudicar al sistema vascular a dosis elevadas, aumentando el riesgo de calcificación. Objetivo: Evaluar la expresión diferencial de proteínas en células de músculo liso vascular sometidas a una dosis suprafisiológica de calcitriol. Material y métodos: Se cultivaron células de músculo liso vascular de rata (SMAC-R) en presencia de 10-7 M de calcitriol durante 10 días. Se valoró el cambio de fenotipo muscular a óseo mediante actividad fosfatasa alcalina, inmunocitoquímica, reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa a tiempo real (qPCR) y Western blot. Mediante electroforesis bidimensional y espectrometría de masas se evaluó el patrón diferencial de proteínas en presencia y ausencia de 10-7M de calcitriol. Resultados: La exposición a una dosis alta de calcitriol disminuyó significativamente la expresión génica de elastina y la expresión génica y proteica de α-actina, aumentado la expresión génica de osteocalcina y Runx2 y la proteica de osteoprotegerina. A nivel proteómico se identificaron 10 proteínas diferencialmente expresadas, destacando el aumento en superóxido dismutasa mitocondrial, proteínas del citoesqueleto, de formación de vesículas y del inflamasoma. Por el contrario, hubo 4 proteínas que disminuyeron su expresión, destacando alguna de tipo muscular. Conclusiones: En un modelo de células de músculo liso vascular sometidas a una dosis suprafisiológica de calcitriol se observó un aumento de expresión de proteínas del citoesqueleto, que forman vesículas de matriz y que participan en depurar radicales libres y en la respuesta inflamatoria. La pérdida de fenotipo muscular se vio representada por descensos en la expresión de proteínas típicamente musculares.