丁香酚增强MSCs对肝星状细胞炎性活化的抑制作用

• Published in: Zhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 44; no. 5; pp. 784 - 791
• Main Authors: 吴逐宇, 汪显耀, 陈艳, 何志旭
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 遵义医科大学免疫学教研室,贵州 遵义 563099%贵州省儿童医院 // 遵义医科大学附属医院小儿内科,贵州 遵义 563099%遵义医科大学 // 教育部组织损伤与再生医学协同创新中心,贵州 遵义 563099 01.09.2023; Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
• Subjects: 人脐带间充质干细胞; 巨噬细胞; 条件培养基; 肝星状细胞; 肝纤维化; liver fibrosis; hepatic stellate cells; 肝星状细胞; 条件培养基; 人脐带间充质干细胞; 肝纤维化; 巨噬细胞; macrophage; condi-tioned medium; human umbilical cord mesenchymal stem cells
• ISSN: 1672-3554
• DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2023.0

R392.9; [目的]研究丁香酚对人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)抑制肝星状细胞(HSCs)炎性活化以及巨噬细胞促炎表型作用的影响及其相关机制;[方法]体外培养并鉴定HUC-MSCs,并采用MTT法评估丁香酚对HUC-MSCs的毒力作用;体外划痕实验探究丁香酚对HUC-MSCs迁移能力的影响;丁香酚处理HUC-MSCs后的旁分泌产物(EU-MSCs-CM)、HUC-MSCs旁分泌产物(MSCs-CM)处理经TGF-β1处理活化的LX-2细胞,WB实验检测LX-2的α-SMA、COL1A1、Smad2/3、p-Smad2/3表达的变化.EU-MSCs-CM、MSCs-CM处理经脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞,流式细胞术检测THP-1巨噬细胞表面标志物CD11b、CD86、CD206的表达情况,qPCR检测THP-1巨噬细胞促炎基因TNF-α、IL-1β、IL-6的表达情况.[结果]MTT法结果显示在0、7.5、15 μg/mL浓度处理细胞24 h、48 h后,细胞活力保持在90%以上;体外划痕显示,丁香酚处理可以增强HUC-MSCs迁移能力.WB结果显示,与MSCs-CM处理相比,EU-MSCs-CM处理对活化状态的HSCs的α-SMA、COL1A1、Smad2/3、p-Smad2/3表达抑制作用更加显著.流式细胞术实验结果显示,与MSCs-CM处理,EU-MSCs-CM处理对THP-1巨噬细胞M1型极化标志物CD86的抑制作用更加显著;qPCR实验结果显示,与MSCs-CM处理,EU-MSCs-CM处理更加显著的抑制THP-1巨噬细胞促炎基因TNF-α、IL-1β、IL-6的表达.[结论]丁香酚增强了HUC-MSCs对HSCs炎性活化抑制作用,可能是通过调节TGF-β1/Smads信号通路抑制HSCs的活化;丁香酚增强了HUC-MSCs对巨噬细胞促炎表型的抑制作用;促炎表型巨噬细胞可以促进HSCs炎性活化.