CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达

• Published in: Zhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 41; no. 6; pp. 875 - 883
• Main Authors: 温艺红, 杨真祯, 张铭, 朱杰宁, 杨莹, 符永恒, 方咸宏, 单志新
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 华南理工大学医学院,广东广州510006%广东省临床药理学重点实验室,广东省人民医院//广东省医学科学院,广东广州510080%华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006%华南理工大学医学院,广东广州510006 2020; 广东省临床药理学重点实验室,广东省人民医院//广东省医学科学院,广东广州510080; 华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006; 南方医科大学第二临床医学院,广东广州510280; Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
• Subjects: 人心房肌成纤维细胞; 微小RNA; 心肌纤维化; 环状RNA; 人心房肌成纤维细胞; 环状RNA; 心肌纤维化; 微小RNA
• ISSN: 1672-3554

R363%R5; [目的]研究环形RNA circRNA_100395调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制.[方法]CircRNAs表达谱芯片分析结合实时荧光定量PCR验证circRNA_100395在长期持续性房颤(AF)病人左心耳组织中的表达.检测血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导人心房肌成纤维细胞(HAFs)中circRNA_100395的表达及在细胞核质中分布情况.利用放线菌素D实验检测circRNA_100395的RNA稳定性.制备重组circRNA_100395腺病毒(rAd-circRNA_100395)并感染HAFs,检测HAFs中纤维化相关基因Col1a1、Col3a1和Acta2的mRNA和蛋白表达.通过双荧光素酶报告基因实验和RNA pull-down实验分别鉴定circRNA_100395与微小RNA miR-144-3p的结合作用.[结果]Masson染色结果显示AF病人心耳组织的纤维化明显加重(P<0.01).CircRNA_100395在AF患者心耳组织中表达降低(P<0.05),但在Ang-Ⅱ诱导的HAFs中表达明显升高(P<0.05),且主要分布于HAFs细胞质内.放线菌素D实验证明circRNA_100395的RNA稳定性明显高于其宿主基因KLHL20 mRNA.过表达circRNA_100395抑制HAFs中纤维化相关基因表达.双荧光素酶报告基因实验和RNA Pull-down实验均证实circRNA_100395与miR-144-3p存在特异性的结合作用.CircRNA_100395可抑制miR-144-3p促HAFs中纤维化相关基因表达的作用.[结论]CircRNA_100395通过特异结合miR-144-3p来发挥抑制纤维化相关基因表达的作用.