长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖表型的影响

• Published in: Zhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 44; no. 5; pp. 792 - 800
• Main Authors: 莫碧瑶, 肖璐, 詹宇威, 杨洋, 刘莉, 林书典
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 海南医学院附属海南医院//海南省人民医院风湿免疫科,海南 海口,570311 01.09.2023; Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
• Subjects: 成纤维样滑膜细胞; 滑膜增生; 类风湿关节炎; 细胞增殖; 长链非编码RNA; 成纤维样滑膜细胞; cell proliferation; 长链非编码RNA; fibroblast-like synoviocytes; 类风湿关节炎; long non-coding RNA; synovial hyperplasia; 滑膜增生; rheumatoid arthritis; 细胞增殖
• ISSN: 1672-3554
• DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2023.0

R593.22%R363; [目的]探讨长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖表型的影响.[方法]收集2022年1月至2022年12月于海南医学院附属海南医院行滑膜清理术或膝关节置换术的4例RA患者及3例创伤性关节炎废弃滑膜组织,分离培养并鉴定FLS细胞.通过qPCR法检测RA组和创伤组滑膜细胞内Ln-cRNA GAPLINC表达水平.利用siRNA干扰技术靶向敲低GAPLINC表达,通过EdU法检测各组细胞增殖水平、流式细胞术检测各组细胞的细胞周期分布情况.通过qPCR法与WB法检测细胞周期调控蛋白cyclin D1、PCNA及周期抑制蛋白P21的表达水平.[结果]本研究通过qRCR验证发现,RA组LncRNA GAPLINC表达水平明显高于创伤组(P<0.05);特异性siRNA对GAPLINC的干扰效率为(85.96±1.76)%(P<0.05).敲低GAPLINC后,EdU细胞增殖实验显示,与空白对照组(6.02±0.48)%、溶剂对照组(6.32±1.48)%和阴性对照组(6.12±1.51)%相比,GAPLINC干扰组S期细胞占(2.89±1.53)%,较各对照组明显降低(P<0.05).利用流式细胞术检测各组细胞周期分布,结果显示GAPLINC干扰组PI值,即S+G2/M期细胞所占的百分比为(14.92±5.34)%,明显低于空白对照组(29.68±8.48)%、溶剂对照组(28.97±6.82)%、阴性对照组(31.13±5.13)%(P<0.05).敲低GAPLINC后,与增殖表型正相关的基因Cyclin D1和PCNA的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),而与增殖表型负相关的基因p21表达上调(P<0.05).[结论]Ln-cRNA GAPLINC在RA-FLS细胞中高表达,敲低GAPLINC表达后,能显著降低RA-FLS细胞增殖活性,抑制细胞周期转化,提示LncRNA GAPLINC可能影响RA-FLS细胞增殖表型,导致滑膜异常增生,参与RA疾病的进展.